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Artigo de método

Criação de abdominais aderências em Ratos

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DOI:

10.3791/54450

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27 de agosto de 2016

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Neste artigo

Resumo

As aderências abdominais que se formam após a cirurgia são uma das principais causas de dor, infertilidade e hospitalização e reoperação por obstrução do intestino delgado. Nosso procedimento cirúrgico para criar aderências abdominais em camundongos é uma ferramenta confiável para estudar os mecanismos subjacentes à formação de aderências.

Resumo

As aderências abdominais consistem em tecido fibrótico que se forma no espaço peritoneal em resposta a um insulto inflamatório, geralmente cirurgia ou infecção intra-abdominal. Os mecanismos precisos subjacentes à formação de aderências são pouco compreendidos. Muitos compostos e barreiras físicas foram testados quanto à sua capacidade de prevenir aderências após a cirurgia com níveis variados de sucesso. O camundongo e o rato são modelos importantes para o estudo das aderências abdominais. Várias técnicas diferentes para a criação de aderências em camundongos e ratos existem na literatura. Descrevemos aqui um protocolo utilizando abrasão do ceco com lixa e suturas colocadas na parede lateral abdominal direita. O camundongo é anestesiado e o abdômen é preparado. Uma laparotomia da linha média é criada e o ceco é identificado. A lixa é usada para lixar suavemente a superfície do ceco. Em seguida, várias suturas em forma de oito são colocadas no peritônio da parede lateral abdominal direita. A cavidade abdominal é irrigada, uma pequena quantidade de amido é aplicada e a incisão é fechada. Descobrimos que essa técnica produz as aderências mais consistentes com a menor taxa de mortalidade.

Introdução

adesões abdominais são uma forma de tecido cicatricial que se formam no abdómen em resposta à inflamação, tipicamente, após a cirurgia ou a infecção intra-abdominal. As aderências são uma das principais causas de dor abdominal crônica e infertilidade, e são a causa mais comum de obstrução do intestino delgado 1. A presença de aderências torna a executar uma segunda operação abdominal mais difícil e aumenta a probabilidade de complicações 2.

Apesar de anos de investigação, os mecanismos subjacentes à formação de aderências permanecem pouco compreendidos. Sabe-se que uma lesão inicial à superfície peritoneal provoca um....

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Protocolo

O protocolo a seguir foi aprovado pelo Comitê Animal Care Institucional e Use da Universidade de Stanford (IACUC) e está em conformidade com todas as normas éticas institucionais sobre o uso de animais de pesquisa.

1. Criação de abdominais aderências

  1. Inicie o rato na dieta de ração de antibiótico, uma semana antes do procedimento.
  2. Autoclave os instrumentos cirúrgicos e pré-aquecer a solução de irrigação salina.
  3. Anestesiar o mouse usando 2% de isoflurano inalado.
  4. Usando uma máquina de cortar cabelo, seguido por uma aplicação rápida (5-10 segundos) de agente depilatório, remover o cabelo de a maioria....

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Resultados

Aos sete dias após a cirurgia, o ceco e, possivelmente, cólon ascendente, fígado e alças de intestino delgado deve ser aderente à parede abdominal do lado direito. (Figura 8) tecido excisado pode ser embebida e seccionada e irá produzir excelentes preparações histológicas. (Figura 11, 12)

Quando o processo é realizado adequadamente, 100% dos murganhos deveria ter aderências substanciais .......

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Discussão

Os passos críticos neste processo são: abrasão completamente o ceco sem causar perfuração, colocando-se suturas na parede lateral abdominal, e aplicar a quantidade certa de amido. Apenas se aplicam lixa ao ceco, ou a uma pequena porção específica do intestino. Amplo uso de lixa em grandes quantidades de intestino delgado tende a causar íleo significativa. Tome cuidado para raspar o ceco com força suficiente para que a superfície torna-se áspera, mas não tanto que as lágrimas de parede. Encontrar esse equilíbrio pode lev.......

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Divulgações

Os autores declaram que não têm interesses financeiros concorrentes.

Agradecimentos

MDL foi apoiada pela American College of Surgeons (ACS) Scholarship Residente Research. MSH foi apoiado pelo Instituto da Califórnia de Medicina Regenerativa (CIRM) bolsa de formação Fellow Clínica TG2-01159. MSH, HPL, e MTL foram apoiadas pela Sociedade Americana de Cirurgiões Maxilo (ASMS) / Maxilo Cirurgiões Foundation (MSF) Research Award Grant. HPL foi apoiado pelo NIH conceder R01 GM087609 e um presente de Ingrid Lai e Bill Shu em honra de Anthony Shu. HPL e MTL foram apoiadas pelo Laboratório Hagey for Pediatric Regenerative Medicine e da Fundação Oak. MTL foi apoiado pelo Fundo / Olivier Gunn.

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Absorventes Fisherbrand, 20" x 24"Fisher Scientific14-206-62
Poliforrado Estéril Campo, 18" x 24"Busse Hospital Descartáveis696Corte um buraco retangular do tamanho apropriado
Isothesia isofluraneHenry Schein 
Fisherbrand Almofada de gaze de algodão estéril, 4 "x 4"Fisher Scientific22-415-469
Pomada oftálmica Puralube petrolato, tubo de 1/8 onçasDechra Veterinary ProductsNDC 17033-211-38
Creme depilatório NairChurch & Fornecedor:Dwight Co.22339-05
Buprenex buprenorfina  0,3 mg/mlReckitt Benckiser Pharmaceuticals Inc.NDC 12496-0757-5
Seringa de insulina de 1 cc, 27  GBecton Dickinson329412
Solução de Preparação de IodopovidonaMedlineMDS093944H
Webcol cotonetes de preparação de álcoolCovidien6818
Fita de rotulagem Labarotory de uso geralVWR89097-912
Luvas cirúrgicas BioGel PIMö lnlycke Health CareALA42675Z
Micro Fórceps com dentesRobozRS-5150
Tesouras finas- afiadasFerramentas de Belas Ciências14060-09
Pinças serrilhadas retasFerramentas de Belas Ciências11050-10
Chave de agulha Castro-ViejoFerramentas de Belas Ciências12565-14
Lixa de 1/4 folha de grão 100ACE Hardware1010446Corte em tiras
4-0 sutura de seda, 30", agulha SHSuturaK831
7-0 PDS II, agulha 30", BV-1EthiconZ135Geralmente vem com braço duplo. Corte a sutura no meio do caminho para gerar duas suturas utilizáveis.
Amidode arroz MP Biomedicals102955
0,9% Cloreto de sódio IrrigaçãoBaxterBHL2F7121Quente para 37 > C antes de usar
seringa de 10 mlBecton Dickinson309604
6-0 Vicryl sutura trançada absorvível, agulha cônica RB-1 de 18",EthiconJ212H
6-0 Monofilamento de nylon de etileno, sutura de 18", agulha P-3, Ethicon1698G
Tegaderm Filme Transparente Estilo de Moldura de Curativo, 6 cm x 7 cm3M1624WCorte ao meio no sentido do comprimento
050033 monofilamento absorvível Ethicon

Referências

  1. Ellis, H., et al. Adhesion-related hospital readmissions after abdominal and pelvic surgery: a retrospective cohort study. Lancet. 353 (9163), 1476-1480 (1999).
  2. Brochhausen, C., et al. Current strategies and fut....

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Reimpressões e permissões

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