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Artigo de método

A geração de fraturas fechadas de fêmur em ratos: um modelo para estudar a consolidação óssea

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DOI:

10.3791/58122

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16 de agosto de 2018

Neste artigo

Resumo

O modelo murino fratura fechada do fêmur é uma plataforma poderosa para estudar a consolidação da fratura e novas estratégias terapêuticas para acelerar a regeneração óssea. O objetivo do presente protocolo cirúrgico é gerar fraturas femorais fechadas unilaterais em camundongos, usando uma haste intramedular aço para estabilizar o fêmur.

Resumo

Fraturas ósseas imponham um enorme fardo socio-económica em pacientes, além de afetar significativamente a sua qualidade de vida. Estratégias terapêuticas que promovem a consolidação óssea eficiente são inexistentes e em alta demanda. Eficazes e reprodutíveis de modelos animais de cura de fraturas são necessários para compreender os complexos processos biológicos associados a regeneração óssea. Muitos modelos animais de consolidação da fratura foram gerados ao longo dos anos; no entanto, modelos de fratura murino surgiram recentemente como poderosas ferramentas para estudar a consolidação óssea. Desenvolveram-se uma variedade de modelos abertos e fechados, mas o modelo de fratura fechada do fêmur se destaca como um método simples para a geração de resultados rápidos e podem ser reproduzidos de forma fisiologicamente relevante. O objetivo do presente protocolo cirúrgico é gerar fraturas femorais fechadas unilaterais em camundongos e facilitar uma estabilização pós-fratura do fêmur através da inserção de uma haste intramedular aço. Apesar de dispositivos como um prego ou um parafuso para oferecer maior estabilidade axial e rotacional, o uso de uma haste intramedular fornece uma estabilização suficiente para resultados consistentes de curativas sem produzir novos defeitos no tecido ósseo ou danificar-se nas proximidades de macio tecido. Imagem radiográfica é usada para monitorar a progressão da formação de calo, união óssea e posterior remodelação do calo ósseo. Resultados de cicatrização óssea são normalmente associados com a força do osso curado e medidos com testes de torção. Ainda assim, compreendendo os início eventos celulares e moleculares associados a reparação da fratura é fundamental no estudo da regeneração do tecido ósseo. O modelo de fratura fechada de fêmur em ratos com fixação intramedular serve como uma plataforma atrativa para estudar a consolidação de fratura óssea e avaliar estratégias terapêuticas para acelerar a cicatrização.

Introdução

Fraturas estão entre as lesões mais comuns que ocorrem para o sistema músculo-esquelético e estão associadas com um enorme fardo socioeconômico, incluindo custos de tratamento que são projetados para superar a US $ 25 bilhões anualmente no Estados Unidos1, 2. Embora a maioria das fraturas cura sem incidentes, a cura é associado com substancial tempo de inatividade e perda de produtividade. Aproximadamente 5-10% de todas as fraturas resultar em um atraso de cura ou não-sindicalizados, devido à idade ou outras condições de saúde crônica subjacente, tais como osteoporose e diabetes mellitus3

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Protocolo

O procedimento a seguir foi realizado com a aprovação do Comitê de uso (IACUC) e Indiana universidade escola de medicina institucional Cuidado Animal. Todas as cirurgias de sobrevivência foram realizadas sob condições estéreis, conforme descrito pelas diretrizes do NIH. Dor e risco de infecções eram geridas com adequada analgésicos e antibióticos para garantir um resultado positivo.

1. anestesia e preparação

  1. Pesar o mouse e anestesiá-lo com uma mistura de cetamina (100 mg/kg) e xilazina (10mg/kg) administrada através de via intraperitoneal (I.P.). Coloque o mouse em uma gaiola vazia e monitorá-lo até que está totalmente s....

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Resultados

O sucesso da implementação do procedimento cirúrgico foi monitorado com imagens radiográficas. Etapas-chave incluem a inserção de uma agulha de haste intramedular, a colocação de um fio-guia, a indução de uma fratura transversal no midshaft a femoral e a estabilização adequada com uma haste intramedular (Figura 2Aeu - 2Aiv). A progressão de cura do calo da fratura foi monitorada com imagens radiográficas semanais até a 28 dia.......

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Discussão

O objetivo deste procedimento cirúrgico é gerar fraturas femorais fechadas padronizadas em camundongos. A principal vantagem desse modelo é que a fixação interna ocorre após a geração da fratura, evitando assim uma angulação da haste intramedular. Talvez o aspecto mais importante deste protocolo é a geração de uma fratura transversal padronizada no midshaft fêmur, como a geometria da fratura é dependente da força de flexão aplicada e o posicionamento do membro hind. Posicionamento incorreto do fêmur durante o momento de .......

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Divulgações

Os autores deste manuscrito não tem nada para divulgar. Os autores ainda afirmam que não há restrições sobre o completo de todo o material utilizado no estudo relatado neste manuscrito.

Agradecimentos

Este trabalho foi apoiado por concessões do departamento de defesa (DoD) nos exército pesquisa médica e Materiel comando (USAMRMC) Congressional dirigido Medical Research programas (CDMRP) (PR121604) e os institutos nacionais de artrite e osteomuscular e dermatoses (NIAMS), NIH R01 AR068332 para Uma Sankar.

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Aparador Oster MinimaxAnimal World Network78049-100
POVIDONA-IODOThermo Fisher Scientific395516
POMADA OFTÁLMICAThermo Fisher ScientificNC0490117
Styker T/Bomba Recirculador de Água QuenteKent Scientific CorporationTP-700
1ml Seringa Sub-QThermo Fisher Scientific
ENCORE Sensi-Touch PFMoore Medical LLC30347Luva cirúrgica sem pó, sem pó
Agulhas hipodérmicas PrecisionGlide 25GThermo Fisher Scientific14-826-49
Fio de Tungstênio de Ultra-Alta Temperatura,McMaster-Carr3775K370.005" de Diâmetro, Carretel de 1/16 lb., 380' de Comprimento
Aço inoxidável 304, tubulação de parede fina 24GMicrogroup Inc304h24tw-5ft
#15 Lâminas de bisturiFerramentas de ciência fina10015-00
#10 Lâminas de bisturiFerramentas de ciência fina10010-00
Pinça de padrão estreitoFerramentas de ciência fina11002-12Serrilhado / reto / 12cm
Pinça de írisde ciência fina11066-071x2 dentes / reto / 7cm
Dissector TesouraFine Science Tools14081-09Lâminas Finas / Angular para o Lado / Sharp-Sharp / 10cm
Tesoura FinaFine Science Tools14058-11ToughCut / Reto / Sharp-Sharp / 11.5cm
Olsen-Hegar Agulha Titular com Cortador de SuturaFine Science Tools12002-12Reto / Serrilhado / 12cm / com Trava
Crile HemostatFine Science Tools13004-14Cortador de fio de tungstênio serrilhado / reto / 14 cm
ACE Surgical Supply Co., Inc.08-051-90ACE #150 Cortador de Fio, pontas de carboneto de tungstênio
3-0 VICRYL SuturaEthiconJ423H3-0 VICRYL UNDYED 27" FS-2 CORTE
piXarray 100 Sistema de Radiografia de Espécime DigitalBioptics, IncSistema de Raios X de
Gabinete Einhorn Dispositivo de Dobra de 3 PontosN/AN/ACustom Built
309597 Ferramentas

Referências

  1. Schnell, S., Friedman, S. M., Mendelson, D. A., Bingham, K. W., Kates, S. L. The 1-Year Mortality of Patients Treated in a Hip Fracture Program for Elders. Geriatric Orthopaedic Surgery & Rehabilitation. 1 (1), 6-14 (2010).
  2. Burge, R., et al.

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Reimpressões e permissões

Etiquetas

Fratura Femoral FechadaModelo de Cicatrização ÓsseaFixação IntramedularCirurgia de Fratura em CamundongosImagem RadiográficaTeste de TorçãoAnálise por Micro-CTFormação de CaloRegeneração ÓsseaProtocolo Cirúrgico