Induzindo a periodontite apical em camundongos

Resumo

Aqui, nós apresentamos um protocolo para induzir localmente o periodontite apical nos ratos. Nós mostramos como perfurar um furo no dente do rato e expor sua polpa, a fim causar a inflamação local. Métodos de análise para investigar a natureza desta inflamação, tais como Micro-CT e histologia, também são demonstrados.

Resumo

Os mecanismos envolvidos na inflamação induzida local podem ser estudados usando vários modelos animais disponíveis. Uma delas é a indução da periodontite apical (AP). O periodontite apical é uma patologia comum de uma natureza inflamatório nos tecidos peridentais que cercam a raiz de dente. A fim compreender melhor a natureza e o mecanismo desta patologia é vantajoso executar o procedimento nos ratos. A indução desta inflamação odontogenic é conseguida perfurando no dente do rato até que a polpa dental esteja expor. Em seguida, a polpa dentária permanece exposta para ser contaminada pela flora oral natural ao longo do tempo, causando periodontite apical. Após este período de tempo, o animal é sacrificado, e o dente e o osso da mandíbula podem ser analisados de várias maneiras. As análises típicas incluem a imagem latente do Micro-CT (para avaliar o resorption do osso), a mancha histológica, Immunohistochemistry, e a expressão do RNA. Este protocolo é útil para a pesquisa no campo da biologia oral para compreender melhor este processo inflamatório em um ajuste in vivo experimental com circunstâncias uniformes. O procedimento exige uma manipulação cuidadosa dos ratos e da maxila isolada, e uma demonstração visual da técnica é útil. Todos os aspectos técnicos dos procedimentos que conduzem ao periodontite apical induzido e sua caracterização em um modelo do rato são demonstrados.

Introdução

O objetivo deste método é induzir o periodontite apical em um rato contaminando o vértice com a microflora natural, e para estudar então várias características deste processo patológico.

O periodontite apical (AP) é uma patologia comum de uma natureza inflamatório nos tecidos peridentais que cercam a raiz de dente. Esta doença dental pode causar a dor severa e deve ser tratada por um dentista. As opções do tratamento incluem o tratamento do canal de raiz (preliminar ou secundário), a cirurgia Endodontic, a extração do dente, ou a continuação dependendo dos resultados clínicos e radiográficos, e da opinião do clínico. O mecanismo desse proce....

Protocolo

Todos os métodos aqui descritos foram aprovados pelo Comitê institucional de cuidado e uso de animais (IACUC) da Universidade Hebraica (ética não. MD-17-15093-5).

1. anestesia animal e posicionamento

1. Prepare soluções estéreis conforme descrito abaixo.
   1. Prepare 5 mL de 7 mg/mL de cetamina e 0, 9 mg/mL de medetomidina diluído em solução tampão fosfato (PBS)/Saline.
   2. Prepare uma solução estéril de Atipamezol (0,4 mg/mL) diluída em PBS/soro fisiológico (recomendado para preparar uma quantidade de 5 mL).
   3. Prepare uma solução estéril de mepivacaína (7,5 mg/mL) diluída em PBS/soro fisiológico para anestesia loc....

Resultados

Um fluxograma das etapas experimentais é apresentado na Figura 1. Como mencionado no protocolo, os camundongos são anestesiados, e seu primeiro molar mandibular de um lado é perfurado até a exposição da polpa, enquanto o dente contralateral é deixado como um controle. Em seguida, os dentes são deixados para ser contaminado pela flora oral por 42 dias, durante o qual eles são monitorados e recebem medicação para a dor. Após 42 dias, os camundongos são eutanasi.......

Discussão

Um método é introduzido aqui para a indução do periodontite apical nos ratos. O objetivo do método é explorar a condição de periodontite apical para estudar mecanismos e conseqüências desse processo inflamatório. O periodontite apical foi induzido em 6-8 ratos velhos da semana, uma idade em que as raizes são desenvolvidas inteiramente²⁴. A fim causar o periodontite apical neste modelo, a polpa de dente de molares mandibulares do rato é expor usando uma rebarba dental. Bactérias da flo.......

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Cloridrato de Atipamezol	Eurovet Saúde Animal	CAS 104075-48-1
ATR	dentsply	tecnika
máquina de bloqueio	Leica	EG1150H
buprenorfina	vetmarket	163451
microscópio clínico/binocular	Olympus	Sz61
broca dental	Komet dental	ZR8801L 315 008
espátula dentária	Premier	1003737
EDTA	J.T Baker	8993
mercúrio entelan		1.07961
Eosina Y solução,	SIGMA	alcoólico HT110116
solução de hematoxilina, Mayer's	SIGMA	MHS 16
Cloridrato	de cetaminaVetoquinol	CAS 1867-669
Cloridrato de medetomidina (cepetor)	CP-pharma GmbH	CAS 86347-15-1
Mepivacaína HCl 3%	Teva	CAS 96-88-8
microescovas - aplicadores de precisão ajustáveis	PARKELL	S379
scanner micro-ct	scanco	uCT 40
parafina	Leica	39602004
PBS	SIGMA	D8537
PFA	EMS	15710
Pomada para os olhos de cloranfenicol (5%)	Rekah farmacêutica	CAS 56-75-7
pinças	WAM	Ref-CT
xilazina	Eurovet Saúde Animal	CAS 7361-61-7
xileno	Gadot	CAS 1330-20-7