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Artigo de método

Implantação de stents coronários de tamanho humano na aorta abdominal de rato usando um acesso trans-femoral

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DOI:

10.3791/61442

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19 de novembro de 2020

* These authors contributed equally

Neste artigo

Resumo

Este protocolo descreve a implantação de stents coronários humanos na aorta abdominal de ratos com um apoE-/- fundo usando um acesso trans-femoral. Em comparação com outros modelos animais, os modelos murinos carregam as vantagens da alta produtividade, reprodutibilidade, facilidade de manuseio e habitação, e uma ampla disponibilidade de marcadores moleculares.

Resumo

A intervenção coronária percutânea (ICI), combinada com a implantação de um stent coronário, representa o padrão-ouro no tratamento intervencionista da doença arterial coronariana. A restenose in-stent (ISR) é determinada por uma proliferação excessiva do tecido neointimal dentro do stent e limita o sucesso a longo prazo dos stents. Uma variedade de modelos animais têm sido usados para elucidar processos fisiopatológicos subjacentes à restenose de stent (ISR), sendo o coronário suíno e os modelos de artéria ilíaca de coelho sendo os mais utilizados. Os modelos murinos oferecem as vantagens de alta produtividade, facilidade de manuseio e habitação, reprodutibilidade e ampla disponibilidade de marcadores moleculares. O modelo de camundongos deficientes apolipoprotein E (apoE-/- ) tem sido amplamente utilizado para estudar doenças cardiovasculares. No entanto, os stents devem ser miniaturizados para serem implantados em camundongos, envolvendo mudanças importantes de suas propriedades mecânicas e (potencialmente) biológicas. O uso de apoE-/- ratos podem superar essas deficiências como apoE-/- ratos permitem a avaliação de stents coronários de tamanho humano e, ao mesmo tempo, fornecendo um fenótipo aterogênico. Isso faz deles um modelo excelente e confiável para investigar isr após a implantação do stent. Aqui, descrevemos, em detalhes, a implantação de stents coronários humanos comercialmente disponíveis na aorta abdominal de ratos com um apoE-/- fundo usando um acesso trans-femoral.

Introdução

A intervenção coronária percutânea (ICI), combinada com a implantação de um stent coronário, representa o padrão-ouro no tratamento intervencionista da doença arterial coronariana1. O sucesso a longo prazo dos stents, no entanto, pode ser limitado pela ocorrência de restenose in-stent (ISR) que é determinada por uma proliferação excessiva de tecido neointimal dentro do stent2,3. O ISR pode exigir uma nova intervenção com bypass da artéria coronária ou re-PCI. Uma variedade de modelos animais foram sugeridos para o estudo do ISR, cada um deles apresentando vantagens e deficiências. As pr....

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Protocolo

Os experimentos foram realizados de acordo com a Lei Alemã de Bem-Estar Animal (TSchG) e a Diretiva 2010/63/UE relativas à proteção de animais utilizados para fins científicos. A aprovação oficial deste estudo foi concedida pelo Comitê Governamental de Cuidados e Uso de Animais (Protocolo nº: AZ 87-51.04.2010.A065; Landesamt für Natur, Umwelt und Verbraucherschutz Nordrhein-Westfalen, Recklinghausen, Alemanha). O protocolo de estudo cumpriu o Guia de Cuidado e Uso de Animais de Laboratório. O tratamento da dor pós-operatória baseia-se nas recomendações da Sociedade Alemã de Ciência Animal Laboratorial (GV-SOLAS), bem como da Terapia Veterinária da Dor.

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Resultados

Este protocolo descreve a implantação de stent na aorta abdominal de ratos utilizando uma rota de acesso trans-femoral(Figura 1). O primeiro ponto central deste modelo animal é que ele permite a implantação de stents coronários de tamanho humano. Um stent coronário comercialmente disponível e montado em balão pode ser colocado na aorta abdominal de ratos. Assim, além disso, o mesmo princípio de implantação de stent como em humanos pode ser aplicado. Outra vantagem do uso de ratos é a disponi.......

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Discussão

Este protocolo descreve a implantação de stents coronários de tamanho humano na aorta abdominal de apoE-/- ratos. Vários pontos técnicos merecem ser enfatizados. Primeiro, deve ser evitada uma incompatibilidade entre o tamanho do stent e o tamanho da aorta. Colocar um stent muito pequeno pode levar à malapa do stent, enquanto a implantação de um stent muito grande para a aorta pode causar excesso de alongamento, rasgos e ferimentos do vaso. Por isso, recomendamos o uso de stents entre 2,0 e 2,5 mm de diâmetro,.......

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Divulgações

Os autores não têm nada a revelar.

Agradecimentos

Gostaríamos de agradecer à Sra. Angela Freund por sua inestimável assistência técnica com a incorporação e produção de slides. Também gostaríamos de agradecer ao Sr. Tadeusz Stopinski no Instituto de Ciência Animal & Cirurgia Experimental do Instituto de Ciência Animal & Experimental por sua ajuda perspicaz com o trabalho veterinário.

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Dieta
SNIFF Dieta rica em gordura + Clopidogrel (15 mg/kg)SNIFF Spezialdiä ten GmbH, Soestpreparado sob medidaWestern Diet
Drugs and Anesthetics
BuprenorphineEssex Pharma997.00.00
ISOFLO (Isoflurane Vapor) vaporizadorEickemeyer4802885
IsofluraneForene AbbottB 506
Solução isotônica (0,9%) de NaClDeltaSelect GmbHPZN 00765145
Solução de lactato de RingerBaxter Deutschland GmbH3775380
(S)-cetaminaCEVA Alemanha
XilazinaMedistar Alemanha
Consumíveis
Seringas de 10 mLBD Plastipak4606108V
Seringas de 2 mLBD Plastipak4606027V
6-0 sutura de proleneETHICONN-2719K
4-0 sutura de sedaSeraflexIC 158000
Bepanthen Pomada para Olhos e NarizBayer Vital GmbH6029009.00.00
Cotonetes de gaze de algodãoFuhrmann GmbH32014
Fita de seda Durapore3M1538-1
Solução de desinfecção da pele com poliálcoolAnti-séptica GmbH72PAH200
Agulha Sterican 18 GB. Braun304622
Agulha Sterican 27 3/4 GB.Braun4657705
Papel de sedadisponívelcomercialmente
Instrumentos cirúrgicos
Pinça Graefe curvada x1Fine Science Tools Inc.11151-10
Graefe fórceps em linha retaFine Science Tools Inc.11050-10
Porta-agulhas MathieuFine Science Tools Inc.12010-14
TesouraFine Science Tools Inc.14074-11
Pinça SemkenFine Science Tools Inc.11008-13
Tesoura cirúrgica pequena curvadaFine Science Tools Inc.14029-10
Tesoura cirúrgica pequena retaFine Science Tools Inc.14028-10
Fórceps padrão padrãoFine Science Tools Inc.11000-12
Tesouras de mola VannasFine Science Tools Inc.15000-08
Equipamento
Microscópio de dissecaçãoLeica MZ9
Almofada de aquecimento com temperatura controladaSygonix26857617
Equipamento para implantação de stent
Stent farmacológico Xience 2,25mm x 8mmAbbott Vascular USA1009544-18
Fio-guia Fielder XT PTCA fio-guia: 0,014" x 300cmASAHI INTECC CO., LTD JapãoSistema de
Abbott 20/30 Priority Pack1000186
Processamento e análise de tecidos
30% H2O2Roth9681Histologia
EtanolRothK928.1Histologia
Giemsas Azur-Eosina-MethylenblauMerck109204 Histologia
Tablet de Desenho GráficoWACOM Europe GmbH CTL-6100WLK-S
Roti Histofix, Formaldeído 4% tamponadoRothP087Histologia
Technovit 9100Morphisto12225.K1000Histologia
seringa de insuflação AGP140302

Referências

  1. Patel, M. R., et al.

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Reimpressões e permissões

Etiquetas

Stents Coronários HumanosRatos Knockout para ApoEProcedimento de Implante de StentRestenose Intra-stentTomografia de Coerência ÓpticaAnálise HistológicaAcesso à Artéria FemoralInsuflação de Balão