Avaliação em tempo real da microperfusão da medula espinhal em um modelo suíno de isquemia/reperfusão

Christoph  R. Behem; Till Friedheim; Sabine H. Wipper; Hans O. Pinnschmidt; Michael F. Graessler; Catharina Gaeth; Hannes Holthusen; Adina Rapp; Timo Suntrop; Josephina Haunschild; Christian D. Etz; Constantin J. C. Trepte

doi:10.3791/62047

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Artigo de método

Avaliação em tempo real da microperfusão da medula espinhal em um modelo suíno de isquemia/reperfusão

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DOI:

10.3791/62047

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10 de dezembro de 2020

Christoph R. Behem¹ , Till Friedheim¹ , Sabine H. Wipper² , Hans O. Pinnschmidt³ , Michael F. Graessler¹ , Catharina Gaeth⁴ , Hannes Holthusen¹ , Adina Rapp⁵ , Timo Suntrop¹ , Josephina Haunschild⁶ , Christian D. Etz⁶ , Constantin J. C. Trepte¹

¹Department of Anesthesiology, Center of Anesthesiology and Intensive Care Medicine, University Medical Center Hamburg-Eppendorf, ²University Department for Vascular Surgery and Department of Operative Medicine, Medical University of Innsbruck, ³Department of Medical Biometry and Epidemiology, University Medical Center Hamburg-Eppendorf, ⁴Department of Vascular Medicine, University Heart and Vascular Center Hamburg (UHZ), ⁵Department of Cardiology, Rostock University Medical Center, ⁶University Department for Cardiac Surgery, Heart Center Leipzig

Neste artigo

Resumo

A microcirculação da medula espinhal desempenha um papel fundamental na lesão medular. A maioria dos métodos não permite a avaliação em tempo real da microcirculação da medula espinhal, essencial para o desenvolvimento de terapias voltadas à microcirculação. Aqui, propomos um protocolo usando sondas Laser-Doppler-Flow Needle em um grande modelo animal de isquemia/reperfusão.

Resumo

Lesão medular é uma complicação devastadora do reparo aórtico. Apesar dos desenvolvimentos para a prevenção e tratamento da lesão medular, sua incidência ainda é consideravelmente alta e, portanto, influencia o desfecho do paciente. A microcirculação desempenha um papel fundamental na perfusão tecidual e no fornecimento de oxigênio e muitas vezes é dissociada da macrohemodinâmica. Assim, a avaliação direta da microcirculação da medula espinhal é essencial para o desenvolvimento de terapias voltadas à microcirculação e para a avaliação das abordagens existentes em relação à microcirculação da medula espinhal. No entanto, a maioria dos métodos não fornece avaliação em tempo real da microcirculação da medula espinhal. O objetivo deste estudo é descrever um protocolo padronizado para avaliação microcirculatória da medula espinhal em tempo real utilizando sondas de agulha laser-Doppler diretamente inseridas na medula espinhal. Utilizamos um modelo suíno de isquemia/reperfusão para induzir a deterioração da microcirculação da medula espinhal. Além disso, foi utilizada uma técnica de injeção de microesfera fluorescente. Inicialmente, os animais eram anestesiados e mecanicamente ventilados. Posteriormente, foi realizada a inserção da sonda de agulha laser-Doppler, seguida pela colocação da drenagem de fluidos cerebrospinais. Foi realizada uma esternotomia mediana para exposição da aorta descendente para realização de fixação cruzada aórtica. A isquemia/reperfusão foi induzida por fixação transversal aórtica supra-celíaca por um total de 48 min, seguida de reperfusão e estabilização hemodinâmica. O fluxo laser-doppler foi realizado em paralelo com a avaliação macrohemodinâmica. Além disso, a drenagem automatizada de fluidos cerebrospinais foi utilizada para manter uma pressão cefalorraquidiana estável. Após a conclusão do protocolo, os animais foram sacrificados, e a medula espinhal foi colhida para análise histopatológica e microesfera. O protocolo revela a viabilidade das medidas de microperfusão da medula espinhal usando sondas laser-Doppler e mostra uma diminuição acentuada durante a isquemia, bem como a recuperação após a reperfusão. Os resultados mostraram comportamento comparável à avaliação da microesfera fluorescente. Em conclusão, este novo protocolo pode fornecer um modelo animal grande útil para estudos futuros usando avaliação de microperfusão da medula espinhal em tempo real em condições de isquemia/reperfusão.

Introdução

Lesão medular induzida por isquemia/reperfusão (SCI) é uma das complicações mais devastadoras da reparação aórtica associada ao resultado reduzido^1,²^,³^,⁴. As opções atuais de prevenção e tratamento para SCI incluem a otimização dos parâmetros macrohemodinâmicos, bem como a normalização da pressão do fluido cefalorraquidiano (CSP) para melhorar a pressão de perfusão da medula espinhal^2,^5,^6,^7,