Roedores não são capazes de relatar sintomas de enxaqueca. Aqui, descrevemos um paradigma de teste gerenciável (ensaios de campo claro/escuro e aberto) para medir a aversão à luz, um dos sintomas mais comuns e incômodos em pacientes com enxaquecas.
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Artigo de método
Investigando comportamento semelhante à enxaqueca usando aversão à luz em camundongos
Neste artigo
Resumo
Resumo
A enxaqueca é uma doença neurológica complexa caracterizada por dor de cabeça e anormalidades sensoriais, como a hipersensibilidade à luz, observada como fotofobia. Embora seja impossível confirmar que um rato está tendo enxaqueca, a aversão à luz pode ser usada como substituto comportamental para o sintoma de enxaqueca da fotofobia. Para testar a aversão à luz, utilizamos o ensaio claro/escuro para medir o tempo que os ratos optam livremente por passar em um ambiente claro ou escuro. O ensaio foi refinado introduzindo duas modificações críticas: pré-exposições à câmara antes de executar o procedimento de teste e iluminação de câmara ajustável, permitindo o uso de uma gama de intensidades de luz de 55 lux a 27.000 lux. Como a escolha de passar mais tempo no escuro também é um indicativo de ansiedade, também utilizamos um teste de ansiedade independente da luz, o ensaio de campo aberto, para distinguir a ansiedade do comportamento leve e aversivo. Aqui, descrevemos um paradigma de teste modificado para os ensaios de campo claro/escuro e aberto. A aplicação desses ensaios é descrita para injeção intraperitoneal de peptídeo relacionado ao gene de calcitonina (CGRP) em duas cepas de camundongos e para estudos de estimulação cerebral optogenética.
Introdução
A enxaqueca é uma doença neurológica prevalente, afetando aproximadamente 17% dos americanos1 e é a segunda principal causa de incapacidade globalmente 2,3. Os pacientes experimentam dor de cabeça que dura de 4 a 72 horas acompanhadas de pelo menos um dos seguintes sintomas: náusea e/ou vômito, ou fotofobia e fonofobia4. Os recentes avanços no desenvolvimento de anticorpos de peptídeos relacionados com genes de calcitonina (CGRP) que agora são aprovados pela FDA iniciaram uma nova era para o tratamento da enxaqueca5,6,7
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Protocolo
Os procedimentos animais foram aprovados pelo Comitê de Cuidados e Uso de Animais da Universidade de Iowa e realizados em conformidade com as normas estabelecidas pelos Institutos Nacionais de Saúde.
1. Ensaio claro/escuro
- Aparato de câmara clara/escura (ver Tabela de Materiais) configuração. Todos os equipamentos desta seção estão disponíveis comercialmente.
- Em uma prateleira, coloque o cubículo atenuante de som (interior: 59,7 x 38 x 35,6 cm em W x H x D) contendo uma gaveta de retirada para fácil acesso à câmara e inserção escura.
- Conecte a fonte de alimentação DC e uma fonte de alimentação r....
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Resultados
Este paradigma de teste comportamental foi projetado para testar o comportamento aversivo da luz. Pode ser realizado usando camundongos selvagens ingênuos e camundongos optogenéticos para investigar a aversão à luz em tempo real durante a estimulação de uma população neuronal direcionada.
Este procedimento tem sido utilizado para estudar o efeito do tratamento periférico de CGRP em camundongos CD1 e C57BL/6J10,16 e estimulação óptica d.......
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Discussão
O ensaio claro/escuro é amplamente utilizado para avaliar comportamentos semelhantes à ansiedade12. O ensaio conta com a aversão inata dos ratos à luz e sua vontade de explorar quando colocados em um novo ambiente (zona de luz). No entanto, como relatamos aqui, este ensaio também pode ser usado para avaliar o comportamento aversivo da luz também.
É fundamental considerar o número e a necessidade de pré-exposições antes dos testes. Isso depende da tensão do mouse ou mode.......
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Divulgações
Os autores não têm conflitos de interesse para relatar.
Agradecimentos
Este trabalho foi apoiado por subvenções do NIH NS R01 NS075599 e RF1 NS113839. Os conteúdos não representam as opiniões da VA ou do Governo dos Estados Unidos.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Monitor de atividade | Med Assoc. Inc | Software de rastreamento do comportamento do mouse | |
| Prateleira | Para ajustar a altura do painel de LED | ||
| Inserção da caixa escura | Med Assoc. Inc | ENV-511 | |
| Fonte de alimentação DC | Med Assoc. Inc | SG-500T | |
| Fonte de alimentação regulada DC | Med Assoc. Inc | SG-506 | |
| Cânula de fibra óptica | Doric | MFC_200/ 240-0.22_4.5mm_ZF1.25_FLT | |
| Toalhetes descartáveis germicidas | Sani-Cloth | SKU # Q55172 | |
| Dissipador de calor | Wakefield | 490-6K | Conectando ao painel de LED |
| Cabo de alimentação do controlador IR | Med Assoc. Inc | SG-520USB-1 | |
| Controlador USB IR | Med Assoc. Inc | ENV-520USB | |
| Manga de acoplamento | Doric | SLEEVE_ZR_1.25 | |
| Painel de luz LED modificado | Genaray Spectro | SP-E-360D | Cor balanceada para luz do dia (5600K) |
| Fonte de alimentação | MEAN WELL USA | SP-320-12 | Conectando ao painel de LED |
| Câmara de campo aberto sem costura | Med Assoc. Inc | ENV-510S | |
| Cubículo de atenuação de som | Med Assoc. Inc | ENV-022MD-027 | |
| Suporte e braçadeira | |||
| Três matrizes IR de 16 feixes | Med Assoc. Inc | ENV-256 |
Referências
- Loder, S., Sheikh, H. U., Loder, E. The prevalence, burden, and treatment of severe, frequent, and migraine headaches in US minority populations: statistics from National Survey studies. Headache. 55 (2), 214-228 (2015).
- Collaborators, G. B. D. H.
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Reimpressões e permissões
