Artigo de método

Investigando comportamento semelhante à enxaqueca usando aversão à luz em camundongos

DOI:

10.3791/62839

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11 de agosto de 2021

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1Department of Neuroscience and Pharmacology, University of Iowa, 2School of Behavioral and Brain Sciences, University of Texas at Dallas, 3Center for the Prevention and Treatment of Visual Loss, Veterans Administration Health Center, Iowa City, IA, 4Department of Molecular Physiology and Biophysics, University of Iowa, 5Department of Neurology, University of Iowa

Neste artigo

Resumo

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Roedores não são capazes de relatar sintomas de enxaqueca. Aqui, descrevemos um paradigma de teste gerenciável (ensaios de campo claro/escuro e aberto) para medir a aversão à luz, um dos sintomas mais comuns e incômodos em pacientes com enxaquecas.

Resumo

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A enxaqueca é uma doença neurológica complexa caracterizada por dor de cabeça e anormalidades sensoriais, como a hipersensibilidade à luz, observada como fotofobia. Embora seja impossível confirmar que um rato está tendo enxaqueca, a aversão à luz pode ser usada como substituto comportamental para o sintoma de enxaqueca da fotofobia. Para testar a aversão à luz, utilizamos o ensaio claro/escuro para medir o tempo que os ratos optam livremente por passar em um ambiente claro ou escuro. O ensaio foi refinado introduzindo duas modificações críticas: pré-exposições à câmara antes de executar o procedimento de teste e iluminação de câmara ajustável, permitindo o uso de uma gama de intensidades de luz de 55 lux a 27.000 lux. Como a escolha de passar mais tempo no escuro também é um indicativo de ansiedade, também utilizamos um teste de ansiedade independente da luz, o ensaio de campo aberto, para distinguir a ansiedade do comportamento leve e aversivo. Aqui, descrevemos um paradigma de teste modificado para os ensaios de campo claro/escuro e aberto. A aplicação desses ensaios é descrita para injeção intraperitoneal de peptídeo relacionado ao gene de calcitonina (CGRP) em duas cepas de camundongos e para estudos de estimulação cerebral optogenética.

Introdução

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A enxaqueca é uma doença neurológica prevalente, afetando aproximadamente 17% dos americanos1 e é a segunda principal causa de incapacidade globalmente 2,3. Os pacientes experimentam dor de cabeça que dura de 4 a 72 horas acompanhadas de pelo menos um dos seguintes sintomas: náusea e/ou vômito, ou fotofobia e fonofobia4. Os recentes avanços no desenvolvimento de anticorpos de peptídeos relacionados com genes de calcitonina (CGRP) que agora são aprovados pela FDA iniciaram uma nova era para o tratamento da enxaqueca5,6,7

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Protocolo

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Os procedimentos animais foram aprovados pelo Comitê de Cuidados e Uso de Animais da Universidade de Iowa e realizados em conformidade com as normas estabelecidas pelos Institutos Nacionais de Saúde.

1. Ensaio claro/escuro

  1. Aparato de câmara clara/escura (ver Tabela de Materiais) configuração. Todos os equipamentos desta seção estão disponíveis comercialmente.
    1. Em uma prateleira, coloque o cubículo atenuante de som (interior: 59,7 x 38 x 35,6 cm em W x H x D) contendo uma gaveta de retirada para fácil acesso à câmara e inserção escura.
    2. Conecte a fonte de alimentação DC e uma fonte de alimentação r....

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Resultados

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Este paradigma de teste comportamental foi projetado para testar o comportamento aversivo da luz. Pode ser realizado usando camundongos selvagens ingênuos e camundongos optogenéticos para investigar a aversão à luz em tempo real durante a estimulação de uma população neuronal direcionada.

Este procedimento tem sido utilizado para estudar o efeito do tratamento periférico de CGRP em camundongos CD1 e C57BL/6J10,16 e estimulação óptica d.......

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Discussão

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O ensaio claro/escuro é amplamente utilizado para avaliar comportamentos semelhantes à ansiedade12. O ensaio conta com a aversão inata dos ratos à luz e sua vontade de explorar quando colocados em um novo ambiente (zona de luz). No entanto, como relatamos aqui, este ensaio também pode ser usado para avaliar o comportamento aversivo da luz também.

É fundamental considerar o número e a necessidade de pré-exposições antes dos testes. Isso depende da tensão do mouse ou mode.......

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Divulgações

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Os autores não têm conflitos de interesse para relatar.

Agradecimentos

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Este trabalho foi apoiado por subvenções do NIH NS R01 NS075599 e RF1 NS113839. Os conteúdos não representam as opiniões da VA ou do Governo dos Estados Unidos.

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Monitor de atividadeMed Assoc. IncSoftware de rastreamento do comportamento do mouse
PrateleiraPara ajustar a altura do painel de LED
Inserção da caixa escuraMed Assoc. IncENV-511
Fonte de alimentação DCMed Assoc. IncSG-500T
Fonte de alimentação regulada DCMed Assoc. IncSG-506
Cânula de fibra ópticaDoricMFC_200/ 240-0.22_4.5mm_ZF1.25_FLT
Toalhetes descartáveis germicidasSani-ClothSKU # Q55172
Dissipador de calorWakefield490-6KConectando ao painel de LED
Cabo de alimentação do controlador IRMed Assoc. IncSG-520USB-1
Controlador USB IRMed Assoc. IncENV-520USB
Manga de acoplamentoDoricSLEEVE_ZR_1.25
Painel de luz LED modificadoGenaray SpectroSP-E-360DCor balanceada para luz do dia (5600K)
Fonte de alimentaçãoMEAN WELL USASP-320-12Conectando ao painel de LED
Câmara de campo aberto sem costuraMed Assoc. IncENV-510S
Cubículo de atenuação de somMed Assoc. IncENV-022MD-027
Suporte e braçadeira
Três matrizes IR de 16 feixesMed Assoc. IncENV-256
de acrílico personalizada

Referências

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  1. Loder, S., Sheikh, H. U., Loder, E. The prevalence, burden, and treatment of severe, frequent, and migraine headaches in US minority populations: statistics from National Survey studies. Headache. 55 (2), 214-228 (2015).
  2. Collaborators, G. B. D. H.

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Reimpressões e permissões

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Etiquetas

Light AversionMigraine Mouse ModelPhotophobia BehaviorLight Dark AssayOpen Field AssayCGRP InjectionOptogenetic StimulationPosterior Thalamic NucleiAnxiety AssessmentChannelrhodopsin 2 Mice

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