De alta resolução de Medição do Comportamento Odor-Driven em larvas de Drosophila

Resumo

Neste artigo de vídeo, descrevemos um método novo que permite a construção de gradientes de odores com geometrias estável e controlável. Brevemente ilustrar como esses gradientes podem ser usados ​​para triagem de defeitos olfativa (anosmia total e parcial) e estudar características mais sutis de comportamento de quimiotaxia.

Resumo

Respostas olfativas em larvas de Drosophila têm sido tradicionalmente estudado em placas de Petri compreendendo uma fonte de odor único periférico. Neste paradigma comportamental, o pesquisador geralmente assume que a rápida difusão de moléculas de odor da fonte leva à criação de um gradiente estável no prato. Estabelecer uma correlação quantitativa entre as entradas sensoriais e respostas comportamentais, é necessário para atingir uma caracterização mais aprofundada das condições de estímulo odorante. Neste artigo de vídeo, descrevemos um método novo que permite a construção de gradientes de odores com geometrias estável e controlável. Brevemente ilustrar como esses gradientes podem ser usados ​​para triagem de defeitos olfativa (anosmia total e parcial) e estudar características mais sutis de comportamento de quimiotaxia.

Protocolo

1. Equipamentos e reagentes

Diluições odor:

• Óleo de parafina (Sigma, número CAS: 8012-95-1)
• Odores dos disponíveis mais alta pureza, que provoca atração em Drosophila larvas ^1. Neste artigo de vídeo, os animais foram testados com acetato de isoamila (Sigma, número CAS: 123-92-2).
• Frascos de vidro de 1,5 ml com tampa de Teflon (Agilent Technologies)
• Escala de medição digital para diluição precisos em peso

Arena de ensaio de set-up:

• Agarose (Promega)
• Tampas de 96 poços de microplacas (BD Falcon, número de catálogo: 353071). Nossa arena co....