Summary
Yaprak bitleri bitki virüsleri etkili vericileri. Virüs biti mikroenjeksiyon, bugün size gösterecektir prosedür, araştırmacılar, gut atlayarak, doğrudan yaprak biti hemocoel, bir circulative şekilde virüs iletimi için 2 önemli engellerin bir virüs enjekte etmek için izin veren bir tekniktir. Aynı teknik ayrıca dsRNA RNAi için enjekte etmek için kullanılır.
Abstract
Patates loafroll virüsü (PLRV), ailesi Luteoviridae solanaceous bitkiler bozar. Öncelikle, yeşil şeftali yaprak biti, aphids tarafından iletilir. Virüs bulaşmamış yaprak biti, virüslü bir bitki beslenir bitki floem aracılığıyla sözleşmeleri. Bir kez yutulur, virüs böcek gut hemolimf (böcek kan) geçmesi gerekir ve ardından yeni bir fabrika geri iletilebilmesi için, tükürük bezi geçmelidir. Bir bitki munching bir yaprak biti farklı virüsler kadar sürebilir, ancak sadece küçük bir bölümünü iletimi için iki ana engellerin daha fazla bitki bulaştırmak için, bağırsak ve tükürük bezinin yoluyla geçecek. Laboratuarda, PLRV iletim çalışma Physalis bitkiler kullanın. Bu konak, belirtiler büyüme geriliği ve interveinal kloroz (yeşil kalan damarlar ile damarlar arasındaki yaprakların sararması) ile karakterizedir. Sunacağımız video vektör PLVR virüs ve gut virüs bulaşmasını önlemenin olup olmadığını testler böceklerin yaprak biti mikroenjeksiyon gerçekleştirmek için bir yöntem gösteriyor. Sunacağımız video vektör PLVR virüs ve gut ya da tükürük bezi virüs bulaşmasını önlemenin olup olmadığını testler böceklerin yaprak biti mikroenjeksiyon gerçekleştirmek için bir yöntem gösteriyor.
Protocol
- Bir yaprak biti vektörü bir virüs olup olmadığını test etmek için, 2 gün boyunca enfekte doku aphids beslenirler.
- Daha sonra, 5 gün boyunca sağlıklı bir bitki beslemek için izin verir. Bitki daha sonra fümige ve 3 hafta sonra belirtiler için aramaya başlamak.
- Vektör bir virüs değil, biz 2 engellerin mikroenjeksiyon işlemi ile virüsü durduruluyor değerlendirebilen bir yaprak biti bulduğumuzda.
- Virüs, böylece gut iletim engelini aşarak, doğrudan hemocoel içine enjekte edilir.
Bitki Biyoloji Yıllık Yorumları ziyaret ediniz böcek herbivory bu protokol ve bitki bağışıklık hakkında daha fazla bilgi için.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
