Crescimento de Cristais para Análise de Difração de Raios-X

1. Preparação do tubo de cristal e filtro

1. Coloque um tubo de RMN em um frasco de Erlenmeyer.
2. Prepare um filtro de pipeta.
   1. Construa o filtro colocando um pedaço de lenço sem fiapos (1 por 1 a 1 polegada)na pipeta e use uma haste para encaixar firmemente a limpeza na porção de gargalo da pipeta(Figura 1).
   2. Faça dois filtros de pipeta para cada tubo de cristal necessário.

2. Adicionando a amostra ao tubo de cristal

1. Dissolva o composto (tetrafenilaporfirina, 10 mg) em 0,75 mL de solvente (diclorometano).
2. Com uma pipeta, adicione suavemente a mistura na parte superior do tubo, passando-a pelo filtro.
   1. As partículas são filtradas para evitar a criação de locais de nucleação, o que pode levar a pequenos cristais múltiplos em vez dos cristais maiores desejados.
3. Uma vez que a amostra tenha sido colocada no tubo de cristal, muito lentamente e suavemente, adicione o anti-solvente (1,5 mL de metanol) ao tubo através de uma nova pipeta de filtro. Permita que o anti-solvente se coloque lentamente na solução adicionada anteriormente (Figura 2). Não use uma lâmpada para empurrar o solvente através da pipeta, em vez disso, deixe o solvente fluir através do filtro por si só.
   1. Certifique-se de que o solvente de maior densidade seja adicionado primeiro ao tubo de cristal.
   2. Verifique se os dois solventes estão errados um com o outro. Isso é feito antes da adição do solvente.
4. Sele o tubo com uma tampa NMR.

3. Crescimento de Cristal

1. Sem fazer com que os dois solventes se misturem, coloque o tubo de cristal em um armário onde eles não serão perturbados.
2. O tempo de cristalização vai variar com cada composto, normalmente os tubos de cristal devem ficar imperturbáveis por uma semana.
3. Depois de uma semana, inspecione os tubos para o crescimento de cristais.
   1. O crescimento de cristal normalmente ocorre na interface dos dois solventes.
   2. Inspecione visualmente os tubos em busca de evidências de crescimento de cristais. Tenha cuidado para não facilitar a mistura dos solventes, caso o composto exija tempo adicional para a formação de cristais.
   3. Se parece que o crescimento do cristal ocorreu, inspecione ainda mais os tubos usando um microscópio.

4. Seleção de Cristal

1. Cristais de difração de raios-X devem ter rostos bem definidos.
2. Cristais que se agruparam devem ser evitados, se possível.
3. Deixe os cristais no tubo de cristal até que estejam prontos para colher o cristal, imediatamente antes de colocar o cristal no difrítômetro.
   1. Manter os cristais no tubo garantirá que os cristais permaneçam solvados. A dess solvação pode fazer com que os cristais quebrem, e dificultar a difração do cristal.

Figura 1. Uma imagem do filtro de pipeta. Um pequeno pedaço de lenço sem fiapos foi firmemente preso ao gargalo da pipeta. As soluções são passadas embora estes filtros de pipeta antes de serem introduzidos no tubo de cristal.

Figura 2. Uma vez que a solução contendo composto direcionado é colocada no tubo de cristal, o anti-solvente é lentamente em camadas em cima, passando-o através de um novo filtro de pipeta.