Sincronização de nematóides: um método para obter populações de vermes em estágios idênticos de desenvolvimento

-Comece colocando vermes autofecundantes em seu último estágio larval em pratos semeados com uma fonte de alimento bacteriano. Permita que as larvas se desenvolvam em adultos maduros até que haja uma abundância de ovos dentro dos vermes e colocados nos pratos. Lave as placas com tampão para coletar os ovos e vermes.

Em seguida, substitua o tampão por uma solução de alvejante que dissolve os vermes adultos. Protegidos pela casca do ovo, os embriões sobreviverão a esse tratamento, embora estejam em diferentes estágios de desenvolvimento. Em seguida, substitua o alvejante por tampão e permita que os embriões se desenvolvam. À medida que as larvas eclodem de suas cascas de ovos na ausência de alimento, o desenvolvimento será interrompido no primeiro estágio larval.

Transfira as larvas para pratos com comida para retomar o desenvolvimento. Isso estimulará a progressão síncrona através dos estágios larvais restantes.

Quando os vermes atingirem o último estágio larval, mova-os para pratos com comida e FUdR, um inibidor da síntese de DNA que impede a produção de descendentes. O desenvolvimento contínuo na presença de FUdR produz uma população de vermes adultos estéreis. Neste experimento,