drosófila Dissecção de disco imaginal de larvas: um método para observar o desenvolvimento de epitélios

- Para iniciar a dissecação, use um par de pinças para agarrar o corpo larval no meio e um segundo par para rasgar a larva ao meio. Em seguida, aperte o gancho da boca na extremidade anterior enquanto segura o corpo na parte posterior. Em seguida, empurre a pinça segurando a boca dentro do corpo. Use a pinça posterior para dobrar a parede do corpo do avesso.

Nesta preparação, as glândulas salivares e o intestino podem ser facilmente identificados e removidos para revelar o cérebro e os discos imaginários. Os discos antenal, ocular, perna, asa e haltere podem ser vistos. Uma vez fixada, transfira a preparação larval para uma lâmina com meio de montagem onde os discos possam ser dissecados posteriormente. No protocolo de exemplo, veremos como dissecar discos imaginais de asas usando esta preparação larval.

- Para começar, use uma vara de madeira ou uma pinça romba para transferir larvas de terceiro ínstar errantes para uma placa de Petri com PBS. Em seguida, genotipe-os sob luz fluorescente para identificar os marcadores fluorescentes apropriados para larvas de mosaico. Antes de prosseguir, lave as larvas com PBS. Em seguida, sob um microscópio de dissecação, use dois pares de pinças