Dissecção do túbulo de Malpighi de uma mosca adulta: isolando um órgão osmorregulador e excretor

- Comece com uma mosca adulta anestesiada em um prato de dissecação. Segure a mosca pelo tórax com uma pinça e abra a extremidade posterior do abdômen usando um segundo par de pinças. Como as moscas adultas têm dois pares de túbulos malpighianos ou MTs que convergem para o intestino através de ureteres comuns, puxe o intestino posterior para fora da mosca para liberar os MTs. O par posterior de MTs será liberado primeiro à medida que circundam atrás do intestino. Continue puxando o intestino para liberar os MTs anteriores e, em seguida, aperte-os no ureter para separá-los da mosca.

Para montar os túbulos, deslize uma haste de vidro sob o ureter e transfira os MTs para uma lâmina revestida de poli-L-lisina. Fixe os órgãos dissecados pressionando o ureter para baixo e, em seguida, varra cuidadosamente a haste sobre os MTs. A poli-L-lisina na lâmina promoverá a fixação, aumentando o número de locais carregados positivamente disponíveis para as células carregadas negativamente dos túbulos se ligarem. No protocolo a seguir, dissecaremos MTs de uma mosca fêmea adulta e os montaremos para imagens ao vivo ex vivo em um sistema de perfusão.

- Para iniciar este procedimento, posicione dois c