0 visualizações • 2:57 min. • April 30th, 2023
- Em uma lâmina de microscópio carregada positivamente, cole duas lamínulas com distância suficiente entre elas para criar um espaço para os cérebros da Drosophila serem montados. Sob o microscópio estereoscópico, pipete os cérebros em meio de montagem nesse espaço. A carga negativa do tecido ajudará os cérebros a aderir à carga positiva na superfície da lâmina.
Remova o excesso de meio de montagem para permitir o posicionamento preciso dos cérebros na lâmina em um padrão de grade com os lóbulos antenais voltados para cima e, em seguida, faça a ponte entre as duas lamínulas colando uma terceira lamínula para cobrir os cérebros.
Para preencher a cavidade, coloque o meio de montagem uma gota de cada vez na borda da cavidade e deixe-o se espalhar por movimento capilar para que não perturbe o cérebro.
Sele a cavidade com esmalte e armazene a 20 graus Celsius negativos no escuro para preservar a fluorescência dos tecidos manchados.
No protocolo de exemplo, montaremos cérebros de Drosophila para imagens confocais de neurônios imunomarcados.
- Para montar os cérebros, construa um escorregador de ponte. Posicione duas tampas de base deslizando aproximadamente um centímetro de distância em
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