Secagem Química: Preparação de Amostras Biológicas para Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV)

- Para começar, comece desidratando e secando uma amostra fixa para reduzir a distorção da amostra causada pela remoção de gases e água líquida na pressão operacional reduzida dos microscópios eletrônicos de varredura convencionais, SEMs.

Para desidratar a amostra, lave-a com concentrações crescentes de etanol em água até atingir 100% de etanol. Em seguida, repita este processo com um agente de secagem químico em etanol até que a amostra seja lavada com agente de secagem puro. Transfira a amostra e o agente de secagem para um prato de evaporação. Cubra-o com o mínimo de agente de secagem adicional e deixe-o secar em um exaustor durante a noite.

Em seguida, monte a amostra preparada no topo de um toco de microscópio usando fita adesiva de carbono. Por fim, aplique tinta prateada nas bordas do toco e, em seguida, da borda do toco em cada uma das amostras, para reduzir o acúmulo de elétrons em excesso, o que pode resultar em artefatos de imagem indesejáveis.

Neste experimento, moscas-das-frutas, Drosophila melanogaster, são preparadas para análise de MEV usando o agente de secagem HMDS.

- Para preparar Drosophila melanogaster, mergulhe as moscas anestesiadas em 1 mililitro de fixador