Incorporação de cabeças de Drosophila adultas em parafina: preparando tecido para histologia

- Para imobilizar moscas para incorporação de parafina, empurre cuidadosamente a Drosophila anestesiada através da abertura de uma coleira de mosca para que suas cabeças fiquem uniformemente posicionadas na parte superior do dispositivo enquanto ainda estão presas ao resto do corpo. Para fixação do tecido, coloque os colares na solução de Carnoy. Carnoy's é um agente de fixação desnaturante que consiste em etanol, clorofórmio e ácido acético.

Para preparar a amostra para infiltração de parafina, desidrate o tecido transferindo o colar através de concentrações graduadas de etanol. Em seguida, transfira o colar para benzoato de metila, um solvente orgânico. Em seguida, coloque-o em uma solução de benozoato de metila e parafina derretida enquanto aquecido para garantir que a parafina permaneça derretida. Prossiga para uma série elaborada de etapas de lavagem apenas com parafina pré-aquecida para remover o benzoato de metila.

Em seguida, coloque rapidamente o colar em um molde e despeje a parafina derretida para cobri-lo completamente. Depois que a parafina endurecer, remova o bloco do molde e use uma lâmina de barbear para aparar o excesso de parafina. Quebre o colarinho deixando a fi