Injeção de moscas adultas de Drosophila: um método de administração de compostos ou rótulos

- Prepare agulhas de injeção cônicas puxando capilares de vidro de paredes finas usando um extrator de agulha. Segure uma agulha sob um microscópio e quebre a ponta, certificando-se de que a abertura seja grande o suficiente para perfurar a cutícula da mosca adulta sem feri-la mais do que o necessário. Meça o volume de injeção carregando sua agulha com um corante estéril e uma solução tampão de sal e, em seguida, ejetando-a em uma gota de óleo mineral em um micrômetro de platina. Use a escala no micrômetro para medir o diâmetro da gota ejetada, que pode ser usada para calcular o volume dispensado, e calibre as configurações do injetor de acordo.

Carregue a agulha com a solução de injeção e monte-a em um bico de injeção. Anestesie suas moscas com CO2 e organize-as em uma almofada de mosca de CO2 que as manterá anestesiadas. Assim que as moscas estiverem na orientação correta para o seu experimento, prossiga com as injeções. No protocolo de exemplo, injetaremos moscas adultas com partículas marcadas com fluoresceína para imagens in vivo.

- Depois de puxar capilares de vidro de paredes finas com um extrator de agulha, use um micrômetro para segurar a agulha sob um microscópio e use um