Ensaio de Preferência de Sabor: Um Método para Medir o Comportamento Alimentar em Drosophila

0 views • 3:45 min • April 30th, 2023

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- Para realizar o ensaio de preferência de sabor, use uma câmara, por exemplo, uma placa de Petri dividida em seções iguais. Se medir a escolha entre duas soluções de sabores diferentes, rotule uma em vermelho e a outra em azul usando corantes alimentares insípidos. Em seguida, coloque gotas igualmente espaçadas de cada solução ao longo da borda do prato em seções alternadas.

Agora adicione moscas anestesiadas e previamente famintas no meio da câmara e cubra o prato. Realize o experimento no escuro para excluir possíveis vieses de cor e incube a 25 graus Celsius durante um período de tempo definido. Quando podem escolher entre duas soluções, mais indivíduos preferem consumir soluções cujo sabor é mais atraente, por exemplo, doce, evitando opções aversivas, como soluções amargas. Pare o experimento movendo a câmara para um freezer.

Para medir o comportamento alimentar e a preferência de sabor, compare o número de moscas com abdômen de cores diferentes. No protocolo de exemplo, veremos uma demonstração do ensaio de preferência de sabor que mede a escolha entre várias soluções de sacarose.

- Para iniciar o experimento, sature uma bola de algodão com água no fundo de um frasco de mosca padrão. Em seguida, colete moscas em conjuntos de 100 animais em uma almofada de CO2 e, em seguida, adicione as moscas a um frasco preparado. Use uma bola de algodão para fechar os frascos. Em seguida, coloque os frascos de lado em uma incubadora com controle ambiental. Prepare o saborizante de controle de sacarose 1 milimolar combinando 10 microlitros de solução de sacarose 100 milimolares, 13 microlitros de corante alimentar vermelho e 977 microlitros de água.

Em seguida, prepare o saborizante experimental de sacarose 5 milimolar. Em seguida, crie as câmaras de ensaio obtendo uma placa de Petri de plástico de 100 milímetros por 15 milímetros e colocando três gotas de 10 microlitros de saborizante de controle o mais próximo possível da borda da placa na posição de 12 horas. Na posição das 3 horas, coloque três gotas de 10 microlitros de saborizante experimental o mais próximo possível da borda do prato. Coloque mais três gotas do saborizante de controle na posição de 6 horas. Em seguida, coloque mais três gotas do saborizante experimental na posição das 9 horas.

Em seguida, esvazie um frasco de 100 moscas famintas em uma almofada de CO2 apenas o tempo suficiente para anestesiar todos os animais. Pincele os animais no meio de uma câmara de ensaio preparada e cubra-a com a tampa do prato. Coloque a câmara de ensaio em uma caixa de papelão opaca. Em seguida, rotule a parte externa da caixa com a condição e o genótipo que estão sendo testados. Mova toda a configuração para uma incubadora. Após duas horas, coloque as câmaras de ensaio, ainda contidas em caixas de papelão, diretamente em um freezer de 20 graus Celsius negativos até que estejam prontas para quantificação.

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Last updated: 25 July 2026