Preparação de filé larval: um método para visualizar neurônios sensoriais intactos e células epidérmicas associadas

- Para orientar uma larva para a dissecção do filé, coloque-a em um prato revestido de silicone contendo solução salina fria e identifique seus lados dorsal e ventral. Os tubos traqueais que correm ao longo de seu comprimento marcam o lado dorsal, enquanto os cintos denticulares abdominais identificam o lado ventral.

Em seguida, com o lado ventral para cima, estique suavemente a larva e prenda cada extremidade no fundo do prato. Esta posição manterá intactos os aglomerados dorsais de neurônios multidendríticos sensoriais e as células epidérmicas associadas à medida que a dissecção prossegue.

Use uma tesoura de dissecação para cortar ao longo da linha média ventral da larva. Prenda a cutícula na placa para achatar a preparação e remova as estruturas internas para revelar o tecido muscular subjacente. Em seguida, remova cuidadosamente o músculo apropriado para expor a epiderme e obter acesso a neurônios previamente obscurecidos, preservando sua morfologia dendrítica.

No protocolo de exemplo, veremos uma demonstração detalhada da preparação do filé larval e remoção muscular para visualizar neurônios sensoriais e células epidérmicas.

- Para começar, adicione solução salina fria suficie