drosófila Coleta e descorionação de ovos: um método para remover a camada mais externa do ovo

0 vistas3:26 min • April 30th, 2023

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

- Permita que a Drosophila ponha ovos durante a noite em um prato contendo ágar suplementado com suco de uva para visualizar os ovos e coberto com fermento para estimular as moscas a acasalar e botar ovos. Para remover os ovos, adicione água destilada ao prato e limpe suavemente a superfície com um pincel. Em seguida, despeje a mistura através de uma malha de náilon colocada em uma bucha de plástico para coletar os ovos. Mergulhe os ovos em duas rodadas de alvejante a 7% para remover o córion, ou camada externa protetora, do embrião. Esse processo é chamado de descorionação.

Os ovos agora estão presos ao lado da bucha. Lave-os três vezes com água para remover o alvejante. Finalmente, use um pincel para transferir os ovos da bucha para os frascos para continuar o desenvolvimento ou para uso imediato em um experimento. No protocolo de exemplo, coletaremos e descorionaremos ovos de Drosophila em condições estéreis para criar moscas com microbiota definida.

- Coloque a malha de náilon em uma bucha de plástico para preparar a peneira para a coleta dos ovos. Se as mesmas moscas forem usadas no dia seguinte, transfira-as imediatamente para uma nova gaiola contendo placas de ágar suco de uva com fermento fresco. O prato de suco de uva na gaiola anterior contém os ovos da mosca-da-fruta. Remova as moscas mortas com um pincel limpo e tome cuidado para não quebrar o ágar. Enxágue a placa de ágar com água destilada e escove suavemente os ovos da superfície do ágar e, em seguida, despeje a pasta sobre a malha para coletar os ovos.

Esterilize o gabinete de biossegurança com etanol a 70% e acenda a luz UV. Pulverize todos os suprimentos não biológicos com etanol 70% e coloque-os imediatamente no gabinete de biossegurança e, em seguida, esterilize-os com luz ultravioleta.

- É fundamental garantir que uma boa técnica asséptica seja praticada ao trabalhar dentro ou ao adicionar ou remover novos materiais ao gabinete de biossegurança.

- Transfira a bucha com os ovos para um copo de amostra de 120 mililitros e despeje lentamente 90 mililitros de solução de hipoclorito de sódio a 0,6%, ou alvejante a 7%, na bucha, logo abaixo da borda. Usando uma pinça, mova periodicamente a bucha para cima e para baixo na solução para ressuspender os ovos. Transfira a bucha diretamente para um segundo copo de amostra pré-preenchido com 90 mililitros de alvejante.

No final do segundo tratamento com alvejante, os ovos devem começar a aderir às laterais da bucha. Descarte o alvejante e enxágue completamente a bucha com água estéril. Novamente, use uma pinça para ressuspender o ovo várias vezes durante cada lavagem. No final da terceira lavagem, a maioria dos ovos deve ser presa na lateral da bucha.

Usando um pincel estéril, transfira os ovos da lateral da bucha para a dieta estéril. Deixe as tampas soltas para permitir que o oxigênio entre no tubo. Os ovos transferidos serão visíveis na superfície da dieta.

09:03

Dechorionation de Embriões Medaka e Transplante de Células de Geração de Quimeras

Vídeos relacionados

0 Visualizações

09:57

Todo o Monte RNA Fluorescente In situ A hibridação de Drosophila Embriões

Vídeos relacionados

0 Visualizações

07:00

Laboratório de criação de moscas estáveis e outros Muscoid Diptera

Vídeos relacionados

0 Visualizações

08:57

Elaboração de Drosophila Os embriões para Live-Imaging Usando o protocolo gota suspensa

Vídeos relacionados

0 Visualizações

13:54

In vivo Centrifugação de Embriões Drosophila

Vídeos relacionados

0 Visualizações

10:38

Preparação Individual Drosophila Ovos Câmaras de imagens ao vivo

Vídeos relacionados

0 Visualizações

02:23

Drosophila melanogaster Dissecção do ovário: uma técnica para preparação de tecido ex vivo

Vídeos relacionados

0 Visualizações

06:27

Remoção mecânica de córion e membrana vitelina: um método para preparar oócitos de Drosophila para observação direta

Vídeos relacionados

0 Visualizações

10:33

Marcação de células individuais no Sistema Nervoso Central de Drosophila melanogaster

Vídeos relacionados

0 Visualizações

12:29

Imagem Vertical de Drosophila Câmaras de ovo

Vídeos relacionados

0 Visualizações

Última atualização: 1 agosto 2026