Dissecção do complexo olho-cérebro de pupas de moscas: um método para isolar o tecido retiniano

- Para começar, prenda uma pupa de mosca da fruta dorsal, ou de volta, com o lado voltado para cima. Remova o opérculo ou a extremidade anterior da pupa para expor a cabeça do animal. Continue a abrir a pupa cortando e descascando o invólucro. Uma vez libertado, cubra a pupa dissecada com PBS para evitar a dessecação. Faça um corte transversal limpo no tórax e remova a parte posterior da carcaça.

Para expor o complexo olho-cérebro, que inclui as duas retinas ligadas aos lobos ópticos, comece a rasgar o epitélio da borda aberta do tórax e continue a abrir a cápsula da cabeça gradualmente. Em seguida, guie cuidadosamente o complexo olho-cérebro para longe dos restos da cápsula da cabeça.

No protocolo de exemplo, veremos uma demonstração de uma dissecção olho-cérebro pupal usada para isolar tecido para várias análises a jusante.

- Depois de colocar as pupas de Drosophila em um prato de dissecação preto, coloque um novo pedaço de fita dupla-face no prato de dissecação, longe das pupas, e use uma pinça para colocar cuidadosamente o lado dorsal das pupas para cima na fita.

Coloque o prato sob um microscópio estéreo e use uma pinça para remover o opérculo de cada pupa. Use uma tesoura de