0 visualizações • 2:59 min. • April 30th, 2023
- Em um tubo contendo tampão M9, colete até 150 vermes hermafroditas no estágio desejado de desenvolvimento. Remova as bactérias dos vermes lavando com tampão M9 e centrifugando a amostra.
View o tubo sob um microscópio de dissecação ao remover o sobrenadante para evitar a perda de amostra. Transfira as minhocas para um prato de vidro com um volume mínimo de tampão M9. Adicione levamisol para anestesiar os vermes.
Localize a cabeça do verme e a faringe, ou intestino anterior, que contém duas estruturas em forma de bulbo. Usei duas agulhas para cortar o verme atrás da faringe. Certifique-se de concluir a dissecção rapidamente para evitar afetar o tecido.
Uma vez que a cutícula é rompida, os dois braços da gônada são extrudados ou empurrados para fora do corpo devido à pressão interna do verme.
Neste exemplo, vamos dissecar gônadas de vermes adultos para análise de imunofluorescência.
- Escolha de 100 a 150 minhocas no estágio de desenvolvimento desejado e colete-as em um tubo de microcentrífuga de 1,5 mililitro contendo 100 microlitros de tampão M9. Em seguida, encha o tubo da microcentrífuga com mais 900 microlitros de tampão M9 e centrifugue-o a 1.000 vezes g por 1 minuto em tempe
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