Ensaio de ponto de luz: um método para investigar o comportamento fototático da Drosophila

- Comece selecionando uma larva de terceiro ínstar, a maior das formas larvais, do meio de cultura e lave-a com água para remover qualquer alimento. Como os olhos larvais, ou órgãos de Bolwig, estão localizados na parte superior frontal da larva, coloque a larva no centro de uma placa de ágar com a fonte de luz acima do animal. Desligue a luz da sala e permita que a larva se acostume ao escuro.

Como a larva é quase imperceptível em um ponto de luz feito por luz visível, acenda as luzes LED infravermelhas para iluminar o animal para a câmera. Espere até que o animal comece a engatinhar direto para controlar seu caminho. Em seguida, gire a placa para que a larva rasteje diretamente em direção ao ponto de luz. Registre o animal rastejando para a luz e depois para longe do ponto de luz. Essa tática de evitar a luz ajuda as larvas a evitar predadores ao se enterrar na comida.

No exemplo a seguir, realizaremos o ensaio do ponto de luz para testar a capacidade de diferentes cepas genéticas de larvas de Drosophila de escapar da luz.

- Antes de introduzir a larva na configuração de imagem, adquira um pequeno vídeo da posição da luz e nomeie o vídeo de fundo de controle não filtrado como "li