Ensaio de sonda de calor local: um método para avaliar a nocicepção de altas temperaturas em larvas de Drosophila

- Para preparar larvas de Drosophila para um ensaio de sonda de calor, colete animais do estágio de desenvolvimento desejado e transfira larvas individuais para uma placa de teste com uma fina película de água. A água permite que as larvas se movam livremente sem grudar na superfície da placa.

As larvas de Drosophila detectam estímulos térmicos nocivos por meio de neurônios sensoriais multidendríticos em sua epiderme, conhecidos como nociceptores. Eles não disparam até que um certo limite sensorial seja atingido, como altas temperaturas potencialmente prejudiciais.

Defina a sonda de calor para uma temperatura que supere esse limite sensorial e faça com que os nociceptores disparem. Pressione suavemente a ponta da sonda contra a larva para aplicar calor. A larva responderá à temperatura nociva com comportamentos termonociceptivos, retirando-se da sonda. Pare quando a larva exibir um papel de 360 graus longe da sonda de calor ou quando um tempo definido tiver decorrido. Registre o tempo de resposta.

No protocolo de exemplo, veremos uma demonstração de um ensaio de sonda de calor localizado em larvas de Drosophila no início do terceiro ínstar.

- Primeiro, predefina a temperatura da so