Dissecção do intestino médio de uma mosca adulta: um método para isolar o trato digestivo

- Para começar, remova a cabeça de uma mosca adulta anestesiada. Cubra a mosca decapitada com uma solução contendo solução salina tamponada com fosfato, ou PBS, e albumina de soro bovino, ou BSA, para evitar a dessecação. Segure a mosca pelo tórax com uma pinça e, em seguida, puxe o abdômen com um segundo par de pinças para expor o intestino. Como a colheita, ou o saco de armazenamento de alimentos, será preso ao tórax, puxe suavemente o intestino para longe do tórax.

Uma vez destacado, puxe a colheita para longe do abdômen para desdobrar o intestino. Puxe a extremidade posterior da mosca para começar a libertar o intestino da cavidade abdominal. Continue puxando o intestino para puxar todo o tecido para fora do abdômen. Uma vez liberado, remova o intestino anterior, os túbulos de Malpighi, o intestino posterior e os ovários para deixar para trás apenas o intestino médio dissecado, o principal local de digestão dentro da mosca.

No protocolo de exemplo, dissecaremos o intestino médio de moscas adultas jovens e velhas para serem analisadas posteriormente por meio de Classificação de Células Ativadas por Fluorescência, ou FACS.

- Antes de iniciar a dissecação, anestesiar um frasco de