0 visualizações • 2:26 min. • April 30th, 2023
- Para medir a vida útil média de uma população de nematóides, comece com larvas L1 sincronizadas com o desenvolvimento no tampão M9. Determine a densidade das larvas e adicione 50 a cada placa. Prepare pelo menos três placas replicadas por condição, bem como placas de backup.
Permita que esses vermes se desenvolvam normalmente até atingirem o estágio L4. Agora você pode adicionar FUdR às placas, o que impedirá que os vermes produzam progênie. Como alternativa, você precisará mover os vermes para novas placas todos os dias após a contagem, para garantir que está medindo apenas a vida útil de uma única geração.
Em seguida, remova todos os machos. Isso removerá as variáveis de sexo e acasalamento do experimento. No dia seguinte, conte o número de vermes vivos no prato, procurando movimento espontâneo ou resposta ao toque suave. Remova todos os vermes mortos e registre os números. Conte os vermes sobreviventes diariamente até que não reste nenhum. No protocolo de exemplo, veremos uma demonstração de um ensaio de vida útil.
- Carregue as placas preparadas com sementes de bactérias com 50 animais L1 cada. Monte as placas em uma incubadora de 20 graus Celsius até que os embriões se desen
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