0 visualizações • 3:21 min. • April 30th, 2023
- Para começar, transfira os vermes adultos jovens para uma almofada de agarose fresca em uma lâmina. Em seguida, adicione algumas gotas de solução de levamisol 12 milimolares para paralisar os vermes. Cubra as minhocas com uma lamínula e aguarde alguns minutos. Coloque a lâmina sob um microscópio confocal de disco giratório e concentre-se na superfície mais externa lateral do verme.
A epiderme de um verme adulto é uma estrutura fina de camada única que consiste em sincícios multinucleados que resultam de eventos de fusão celular. A superfície apical da epiderme secreta uma cutícula colagenosa flexível, enquanto a superfície basal é coberta por uma fina camada de matriz extracelular chamada lâmina basal.
Em seguida, enrole a superfície apical da epiderme com um laser. O citoplasma das células danificadas pode vazar, aparecendo como uma bolha no local da ferida.
A irradiação a laser tem vantagem sobre outras técnicas, como o ferimento por agulha, pois causa ruptura localizada da cutícula e das células epidérmicas, sem danificar os tecidos internos. No protocolo de exemplo, veremos o processo de ferimento a laser em C. elegans.
- Para enrolar com precisão os nematóides, este protocol
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