Aplicação de ultrassom de baixa frequência: um método para determinar o efeito da sonicação em células de leucemia humana

- Para começar, semeie as células de leucemia humana em um meio de cultura recém-preparado e incube pelo período desejado. Após a incubação, corar uma pequena quantidade desta suspensão celular com azul de tripano e avaliar a viabilidade celular usando uma lâmina de contador de células TC20. As células mortas são permeáveis e absorvem o corante carregado negativamente, enquanto as células viáveis são impermeáveis.

Em seguida, adicione metil beta ciclodextrina ao frasco de cultura para esgotar suficientemente o colesterol da célula, tornando-a suscetível ao ultrassom. Incube as células pelo período desejado. Encha o sistema de sonicação celular com água deionizada e desgaseifique por alguns minutos para evitar bolhas de vácuo. Transfira a quantidade desejada de células no frasco de cintilação e conecte o frasco ao dispositivo de retenção do sistema de sonicação celular.

Coloque o dispositivo de retenção em cima da buzina e defina a elevação desejada a partir do topo da buzina. Defina os pulsos necessários para a duração desejada para sonicar as células. Adicione azul de tripano à suspensão celular e coloque-o no contador de células TC20 para analisar a viabilidade e os danos celular