Leucemia

Este vídeo descreve a técnica de coloração de células da medula óssea usando a coloração de May-Grünwald Giemsa. No protocolo, coraremos as células de leucemia mieloide murina, células C149, para analisar a morfologia e contagem diferencial.

Este vídeo descreve o enriquecimento de células T do baço de um camundongo por seleção negativa usando um separador magnético. A técnica envolve direcionar as outras células da amostra para depleção usando anticorpos ou ligantes direcionados contra antígenos específicos da superfície celular.

Este vídeo descreve a técnica de isolamento de células positivas do c-kit da medula óssea de um camundongo. No protocolo, isolaremos células positivas para c-kit de um camundongo transgênico para validar c-Fos e Dusp1 sozinhos ou juntos como alvos de drogas na leucemia.

Este vídeo descreve o protocolo para coloração de imunofluorescência BrdU. A técnica permite a identificação de células em diferentes fases do ciclo celular. A adição de corantes de DNA e marcação de anticorpos permite a análise detalhada do destino das células da fase S em momentos posteriores.

Este vídeo descreve a técnica de isolamento de células de leucemia linfocítica crônica (LLC) do sangue periférico. Com este protocolo, isolaremos as células da LLC da amostra de sangue do paciente humano para posterior geração eficiente de frações nucleares e citoplasmáticas.

O vídeo explica uma maneira de purificar as células B por direcionamento imunomagnético e separação da suspensão de células mononucleares do sangue periférico. O método envolve a marcação de tipos de células indesejadas com anticorpos ou ligantes específicos (ligados a partículas magnéticas) direcionados a proteínas específicas da superfície celular, a serem esgotadas da suspensão celular heterogênea por separação magnética.

Este vídeo descreve um método para separação espacial de três subpopulações de células leucêmicas: as células leucêmicas suspensas flutuando livremente no meio, células leucêmicas brilhantes de fase aderidas à superfície da monocamada de células estromais mesenquimais e as células leucêmicas de fase fraca que migraram sob a monocamada de células estromais mesenquimais da co-cultura 2D.

Este vídeo descreve um protocolo detalhado para isolar a medula óssea inteira fresca dos membros posteriores do camundongo para investigar defeitos de MO total para pacientes com doenças do sangue, como leucemia.

Este vídeo descreve a separação de células de leucemia linfoblástica aguda de células estromais da medula óssea usando colunas G-10 de dextrana reticulada tipo gel dez Este método ajuda a recuperar a população de células tumorais que migraram abaixo das células estromais da medula óssea aderentes, gerando uma população de células tumorais de "fase escura".

O vídeo descreve um método de amostragem para coleta de sangue periférico do seio retroorbital de um camundongo e posterior isolamento de células mononucleares do sangue com centrifugação por gradiente de densidade.

Este vídeo descreve a técnica de aspiração da medula óssea da coluna ilíaca e a preparação do esfregaço para biópsia. No exemplo, realizamos aspiração de medula óssea de um paciente com leucemia mieloide aguda (LMA) e examinamos as células para verificar se há doença residual mensurável (MRD), um importante biomarcador prognóstico.

Este vídeo descreve um protocolo para a geração de células dendríticas - células-chave apresentadoras de antígenos que ativam as células T - da medula óssea de um camundongo adulto.

Este vídeo descreve o protocolo para isolar HSPCs da medula óssea e classificá-los usando uma técnica de classificação de células ativadas por fluorescência, que é um método para obter HSPCs individualmente classificados. Cultivamos essas células selecionadas para obter clones de HSPC.

Este protocolo descreve a técnica de isolamento de células T marcadas com...

O protocolo a seguir descreve um método para isolar a população lateral de células T de células T A população secundária carece de marcadores celulares proeminentes e, portanto, usamos o ensaio de efluxo de corante Hoechst 33342 para isolá-los.

Este vídeo descreve o protocolo para cisalhamento da cromatina usando digestão enzimática de nuclease microcócica. O cisalhamento da cromatina é uma etapa essencial na imunoprecipitação da cromatina ou fluxo de trabalho ChIp, que ajuda a investigar a interação proteína-DNA em células de leucemia mielóide crônica humana. No protocolo de recurso, o cisalhamento da cromatina é realizado usando sonicação.

Este vídeo descreve o dano seletivo das células de leucemia humana usando ultrassom de baixa frequência. Esta aplicação de ultrassom de baixa frequência em uma condição pré-clínica in vitro demonstra que a destruição celular pode ser alcançada para examinar e comparar os efeitos da sonicação na leucemia e nas células normais.

Este artigo descreve o protocolo para o ensaio XTT, que é um ensaio colorimétrico para avaliar a viabilidade celular e a atividade mitocondrial.

O vídeo descreve o ensaio de marcação de pulso passo a passo de células de mamíferos com bromodeoxiuridina (BrdU) para medir a proliferação celular. A captação de BrdU permite o rastreamento temporal de células que estavam na fase de síntese em um ponto específico no tempo, sem exigir que as células sejam sincronizadas.

Este vídeo descreve a técnica de co-cultura 2D de longo prazo de células de leucemia com células estromais da medula óssea para estudar sua interação com o microambiente da medula óssea. O modelo de cocultura 2D utiliza as células de leucemia linfoblástica aguda e o estroma da medula óssea ou osteoblastos que influenciam o fenótipo das células tumorais. Este estudo apoiará a investigação dos mecanismos subjacentes à sobrevivência suportada pela medula óssea de células leucêmicas durante a...

Este vídeo descreve a preparação de frações subcelulares de células leucêmicas, que é um método para gerar frações celulares e nucleares de células leucêmicas. As frações nuclear e citoplasmática podem ser usadas para análises posteriores a jusante.

Este protocolo fornece uma abordagem bioquímica para medir a taxa de acidificação extracelular (ECAR) e a taxa de consumo de oxigênio (OCR) de células leucêmicas primárias com ensaio de fluxo extracelular. A avaliação do perfil metabólico dessas células ajuda a caracterizar suas demandas, levando a uma terapia personalizada.

Este vídeo descreve o protocolo para ensaio de imunoprecipitação da cromatina (ChIP), que é uma técnica clássica para demonstrar interações proteína-DNA. Esta técnica é usada para identificar genes-alvo em células de leucemia linfocítica crônica humana.

Este vídeo descreve o protocolo de validação genética por meio da transferência de genes-alvo usando retrovírus em linhagens celulares de leucemia mieloide crônica. Os retrovírus atuam como um mediador para transferir material genético para a célula de leucemia por meio do processo chamado transdução, que permite a expressão a longo prazo do gene alvo. Este método pode ser aplicado a qualquer célula-alvo para validação genética e desenvolvimento terapêutico.

Este vídeo descreve o protocolo para unidade de formação de colônias à base de metilcelulose ou ensaio UFC, que ajuda a identificar e contar o número de colônias formadas por células leucêmicas em resposta ao tratamento com compostos anticancerígenos.

Este vídeo explica um método quantitativo de cromatografia líquida de alta eficiência de fase reversa (RP-HPLC) para medir o metabolismo da adenosina e purinas associadas geradas pelo consumo de AMP em ambiente extracelular de células cancerígenas leucêmicas. O protocolo descreve um ensaio RP-HPLC sensível, específico, confiável e reprodutível, desenvolvido e validado para a quantificação de nucleotídeos e nucleosídeos de purina extracelular produzidos por células purificadas de leucemia...