Co-cultura 2D de células leucêmicas com BMSCs: um método para obter subpopulações de células leucêmicas

- Em um sistema de co-cultura 2D, vários tipos de células são cultivados juntos em placas de cultura planas. Este sistema de cultura facilita o estudo das interações e do comportamento celular in vitro. Para estabelecer a co-cultura de células leucêmicas com células estromais da medula óssea, ou BMSCs, adicione a suspensão de células leucêmicas a uma cultura de monocamada aderente de BMSCs. Incube a placa sob condições de cultura apropriadas. Manter a co-cultura substituindo 90% do meio de cultura a cada quatro dias.

Durante esta co-cultura 2D, as células leucêmicas interagem com as BMSCs e se localizam em regiões distintas da cultura, formando três subpopulações. A microscopia de contraste de fase permite diferenciar visualmente as três subpopulações. O primeiro grupo de células leucêmicas que aparece flutuando livremente no meio é categorizado como células suspensas. O segundo grupo de células leucêmicas que aderiram à superfície da monocamada BMSC parece brilhante e são categorizadas como células de fase brilhante.

O terceiro grupo de células leucêmicas que migraram abaixo da monocamada parece fraca e é categorizada como células de fase fraca. No protocolo a seguir, realizamos a