Classificação de células de leucemia baseada em coluna G-10: um método para purificar células de leucemia linfoblástica aguda de células estromais da medula óssea

- Para começar, adicione tripsina a uma placa contendo células de leucemia co-cultivadas com células estromais da medula óssea para dissociação celular. Centrifugue e ressuspenda o pellet usando meios pré-aquecidos para manter a viabilidade celular. A coluna G-10 contém grânulos de dextrano reticulados que incham na água para formar uma matriz de gel.

Equilibre a coluna G-10 com mídia pré-aquecida para preencher o espaço entre as contas, garantindo uma ilusão lenta da mídia da coluna. Mantenha uma temperatura adequada na coluna para evitar a formação de bolhas de ar. Carregue a mistura de células lentamente nas esferas de gel na coluna G-10. Incube as células na coluna G-10 à temperatura ambiente pela duração desejada. Com base nas características e tamanho da superfície celular, as esferas de gel restringem preferencialmente as células estromais maiores da medula óssea, permitindo a separação das células leucêmicas.

Adicione meios pré-aquecidos à coluna e colete a suspensão das células de leucemia. Centrifugar a suspensão celular e ressuspender o pellet num tampão adequado. Use a população pura de células de leucemia para análise posterior. No exemplo a seguir, separaremos uma pop