Ensaio de Fluxo Extracelular: Um Método para Medir o Perfil Metabólico das Células

- O ensaio de fluxo extracelular ajuda a estudar o metabolismo celular medindo as duas principais vias de energia - glicólise e respiração mitocondrial. Durante a glicólise, as células metabolizam a glicose e secretam lactato no espaço extracelular junto com os prótons, determinados pela medição da Taxa de Acidificação Extracelular ou ECAR. Durante a respiração mitocondrial, as células utilizam oxigênio para a produção de ATP, medido pela determinação da Taxa de Consumo de Oxigênio ou OCR.

As células cancerígenas exibem alta captação de glicose à medida que alteram sua taxa metabólica para se adaptar e manter a proliferação celular desregulada. Para analisar o metabolismo em células cancerígenas, primeiro monte uma microplaca de análise de fluxo contendo monocamada de células cancerígenas aderentes e um cartucho sensor hidratado. Transfira o conjunto da placa para um analisador de fluxo. Dentro do analisador, as sondas do sensor descem para criar uma microcâmara transitória. Para medir o fluxo extracelular, a porta de injeção introduz compostos de teste na microplaca em pontos de tempo predefinidos.

Com base no metabolismo celular, as concentrações de oxigênio disponíveis e prótons