Ensaio de UFC à base de metilcelulose: um método para determinar o efeito de compostos anticancerígenos na formação de colônias em células leucêmicas

- Às vezes, uma célula-tronco ou progenitora sofre mutações, dando origem a uma célula-tronco leucêmica. Nessas células, certas proteínas são reguladas positivamente, e o uso de compostos anticancerígenos contra essas proteínas pode ajudar a controlar o crescimento das células. O efeito desses compostos anticancerígenos pode ser analisado usando o ensaio de UFC, monitorando o número e o tamanho das colônias formadas.

Comece pegando células progenitoras de um camundongo leucêmico e diluindo-as em um meio de cultura adequado. Adicione esta suspensão celular junto com o composto anticancerígeno apropriado à metilcelulose contendo citocinas específicas de camundongos e despeje-a em uma placa de Petri. Incube esta mistura até que as colônias apareçam. A metilcelulose é uma matriz semi-sólida quimicamente inerte que impede a migração celular, enquanto as citocinas estimulam as células progenitoras a se diferenciarem e formarem colônias contendo progênie reconhecível.

Em seguida, core as colônias usando cloreto de iodonitrotetrazólio, ou INT, e incube durante a noite até que as colônias fiquem marrom-avermelhadas escuras. As enzimas mitocondriais reduzem o INT de cor amarela ao corante fo