Seleção Imunomagnética Negativa: Um Método para Purificar Células B de Células Mononucleares do Sangue Periférico

As células mononucleares do sangue periférico ou PBMCs incluem células B, células T, células natural killer ou NK e monócitos. As células B produzem moléculas de imunoglobulina para combater infecções. Na leucemia, essas células se multiplicam e metastatizam para diferentes órgãos.

Para isolar as células B, comece com uma suspensão de PBMCs isoladas. Adicione uma mistura de anticorpos primários direcionada contra moléculas específicas da superfície celular chamada cluster de diferenciação ou CD. Anticorpos específicos se ligam à molécula de CD-3 nas células T, à molécula de CD-14 nos monócitos e à molécula de CD-16 nas células NK, deixando as células B sem marcação.

Em seguida, lave a amostra para remover os anticorpos não ligados. Adicione microesferas magnéticas conjugadas com anticorpos secundários à amostra. Os anticorpos secundários se ligam à região FC dos anticorpos primários ligados a células específicas. Coloque o tubo contendo a suspensão celular marcada sob a influência de um campo magnético. No campo, as células marcadas magneticamente migram e se ligam à parede do tubo, levando à seleção negativa das células indesejadas. Recolher o sobrenadante contendo células B enriq