Isolamento de células T-ALL marcadas com fluorescência: um método para isolar células T-ALL de peixe-zebra adulto

- A leucemia linfoblástica aguda de células T, ou T-ALL, é um tipo de câncer que ocorre quando os linfócitos não amadurecem e permanecem como células imaturas chamadas linfoblastos. Essas células anormais são ineficazes no combate à infecção. Como essas células imaturas se dividem rapidamente, elas superam as células sanguíneas saudáveis e podem viajar para órgãos como baço, fígado e SNC.

Os tumores no peixe-zebra são semelhantes aos formados em humanos. Portanto, o peixe-zebra é o modelo preferido para gerar células tumorais T-ALL.

Comece selecionando os peixes transformados que exibem sinais fluorescentes, indicando a disseminação de células tumorais. Remova a cabeça do peixe sacrificado e lave a cavidade corporal com solução de heparina para remover o excesso de glóbulos vermelhos. Agora, injete um tampão adequado na cavidade do corpo. Aplique uma leve pressão de fora e colete o tampão contendo células tumorais em um tubo de microcentrífuga.

Pinte as células com azul de tripano e observe-as ao microscópio. As células tumorais vivas parecem fluorescentes e incolores quando coradas com azul de tripano, pois a membrana celular carregada negativamente exclui o azul de tripano negati