Geração de reconstruções organotípicas de pele completa: um procedimento para estabelecer um modelo de pele 3D usando amostras de pele humana
Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Pesquisa sobre o Câncer
0 visualizações • 4:07 min. • April 30th, 2023
A pele consiste principalmente em uma camada epidérmica superior e uma camada dérmica inferior. As células epidérmicas são estratificadas em múltiplas camadas, desde as células menos diferenciadas presentes na base até as células altamente diferenciadas na periferia. Para cultivar um tecido cutâneo que imite os aspectos morfológicos e bioquímicos da pele normal, podemos estabelecer um modelo de pele organotípica.
Para começar, pegue uma placa de vários poços com uma inserção membranosa. Adicione fibroblastos dérmicos misturados com colágeno à inserção. Incube para facilitar a solidificação da matriz de colágeno para incorporar os fibroblastos e imitar o compartimento dérmico da pele.
Em seguida, adicione uma suspensão de células de queratinócitos sobre a camada dérmica. Incube a placa para permitir que os queratinócitos adiram ao compartimento dérmico. Suplementar a cultura com um meio de epidermalização para iniciar a proliferação de queratinócitos e a formação de uma camada epidérmica.
Por fim, transfira as pastilhas para uma nova placa de vários poços. Adicione um meio de estratificação de modo que cubra apenas a base da construção, criando assim uma interface ar-líquido. Após a
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