JoVE Encyclopedia of Experiments
Neurociência
0 vistas • 1:23 min • March 4th, 2025
Pegue seções cerebrais quimicamente fixadas e embebidas em parafina de um rato com infarto cerebral, onde o fluxo sanguíneo restrito causa a morte celular na região afetada.
Mergulhe o tecido em xileno para dissolver a parafina.
Mergulhe o tecido em álcool absoluto para remover o xileno residual.
Hidrate o tecido passando-o por concentrações decrescentes de álcool.
Enxágue o lenço com água para eliminar o álcool residual.
Aplique hematoxilina, um corante básico que se liga ao DNA, corando os núcleos de roxo.
Enxágüe com água e álcool ácido para remover o excesso de hematoxilina.
Enxágüe com uma solução alcalina para tornar a mancha nuclear azul.
Aplique eosina, um corante ácido que cora as proteínas da matriz citoplasmática e extracelular carregadas positivamente de rosa.
Desidrate o tecido usando concentrações crescentes de álcool.
Mergulhe o tecido em xileno para limpá-lo, depois monte e visualize ao microscópio.
As áreas de controle aparecem rosa com núcleos azuis, enquanto as áreas infartadas parecem pálidas devido à coloração insuficiente causada pela morte celular.