JoVE Encyclopedia of Experiments
Neurociência
0 vistas • 1:18 min • March 4th, 2025
Chlamydia pneumoniae são bactérias patogênicas que podem infectar o cérebro humano.
Para detectar essas bactérias, faça uma seção do cérebro humano desparafinizado, reidratado e infectado por bactérias com antígenos proteicos expostos e fosfatase endógena inativada.
Adicione uma solução de bloqueio para evitar a ligação de anticorpos não específicos.
Incubar com anticorpos primários que se ligam ao antígeno bacteriano alvo.
Lave com um tampão para remover anticorpos não ligados.
Adicione a solução de bloqueio para aumentar a especificidade do anticorpo secundário.
Incubar com anticorpos secundários conjugados com fosfatase alcalina, que se ligam a anticorpos primários.
Enxágüe com água para remover o excesso de anticorpos.
Adicione um substrato cromogênico que reaja com a fosfatase alcalina, formando um precipitado colorido.
Enxágüe com água para remover o excesso de precipitado.
Adicione um corante para manchar os núcleos.
Adicione mídia de montagem para montar a seção.
Sob um microscópio de luz, visualize bactérias coradas no tecido cerebral.