Análise Microscópica Eletrônica de Dano de Mielina em um Modelo de Rato de Lesão do Nervo Óptico

0 vistas1:25 min • March 4th, 2025

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Pegue seções fixas do nervo óptico de um rato controle e um rato com lesão do nervo óptico.

A seção de controle exibe axônios com bainhas de mielina compactadas contendo camadas concêntricas de membrana plasmática. A seção lesada exibe mielina descompactada com grandes lacunas.

Incubar com um complexo de ósmio-ferrocianeto que se liga aos lipídios e aumenta o contraste da bainha de mielina.

Trate com tiocarbohidrazida para criar locais de ligação adicionais para o ósmio.

Reaplique o ósmio para aumentar ainda mais o contraste lipídico.

Mancha com metais pesados, que se ligam a macromoléculas e aumentam o contraste estrutural.

Desidrate usando concentrações crescentes de álcool e enxágue com acetona para inclusão de resina.

Incorpore o tecido em resina e cubra a resina com ouro para melhorar a qualidade da imagem.

Use microscopia eletrônica de varredura de face de bloco serial para fatiar e criar imagens simultaneamente. Focalize o feixe de elétrons na superfície e detecte os elétrons retroespalhados para gerar imagens.

As bainhas de mielina parecem escuras, enquanto os espaços dentro das bainhas danificadas parecem mais claros, permitindo a diferenciação entre mielina normal e danificada.

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Última atualização: 1 agosto 2026