Detecção de proteínas Tau fosforiladas em amostras de cérebro de camundongos usando análise de Western Blot

0 views • 1:25 min • March 4th, 2025

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Comece com um tecido cerebral de camundongo em um tampão de extração contendo inibidores de protease e um detergente.

Homogeneizar o tecido para liberar proteínas no tampão. Os inibidores de protease bloqueiam a atividade da protease, impedindo a degradação da proteína.

Centrifugar e recolher o sobrenadante com proteínas.

Adicione um tampão de carregamento contendo detergente e um agente redutor para desnaturar a proteína.

Carregue as proteínas do controle e a amostra em um gel SDS-PAGE. Aplique um campo elétrico para separar proteínas em bandas distintas.

Após a eletroforese, transfira as bandas de proteínas para uma membrana.

Trate a membrana com um tampão contendo leite sem gordura para bloquear locais de interação não específicos.

Incubar com anticorpos primários que se ligam especificamente a proteínas tau fosforiladas.

Lave e incube com anticorpos secundários conjugados com enzimas.

Adicione um substrato que reaja com a enzima para produzir um sinal de luz, confirmando as proteínas tau fosforiladas.

Uma faixa luminosa intensa na amostra em comparação com o controle sugere patologia neurodegenerativa.

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Last updated: 25 July 2026