Coloração de prata de emaranhados neurofibrilares em seções cerebrais de um modelo de camundongo com doença de Alzheimer

Pegue seções cerebrais quimicamente fixadas obtidas de um modelo de camundongo fêmea da doença de Alzheimer.

Essas seções contêm emaranhados neurofibrilares - agregados anormais da proteína tau encontrados nos neurônios do hipocampo.

Lave as seções com tampão, seguido de água deionizada.

Tratar com ácido periódico para oxidar grupos glicosil associados aos agregados, formando grupos aldeídos.

Lave com água deionizada e adicione uma solução alcalina de iodeto de prata. Os íons de prata formam complexos com os aldeídos, criando locais de nucleação.

Lave com um ácido fraco diluído para remover a prata não ligada e neutralizar o pH.

Enxágüe com água deionizada.

Adicione uma solução de revelação resfriada contendo um agente redutor para converter íons de prata em prata metálica, produzindo uma cor marrom pálida.

Enxágüe com um ácido fraco diluído para interromper o desenvolvimento.

Monte as seções, desidrate-as usando concentrações crescentes de álcool e aplique um meio de montagem.

Sele as seções com uma lamínula.

Usando um microscópio de luz, visualize os emaranhados neurofibrilares.