Visualizando a neurotransmissão usando falsos neurotransmissores fluorescentes

0 views • 1:29 min • March 4th, 2025

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Comece com uma fatia de cérebro rica em neurônios dopaminérgicos.

Incube a fatia em aCSF contendo falsos neurotransmissores fluorescentes ou FFNs.

Os FFNs são marcadores sensíveis ao pH que imitam a dopamina e fluorescem mais intensamente em ambientes neutros do que ácidos.

Esses FFNs entram seletivamente nos neurônios dopaminérgicos e são carregados em vesículas sinápticas ácidas, onde a mudança de pH reduz a fluorescência do FFN.

Transfira esta fatia para uma câmara de imagem, prenda-a e perfunda continuamente com aCSF para remover FFNs não ligados.

Visualize a fatia para confirmar o acúmulo de FFN como ponto fluorescente.

Em seguida, posicione um eletrodo estimulante para fornecer estimulação elétrica.

Os pulsos elétricos fazem com que o cálcio entre no neurônio, levando à fusão da vesícula sináptica com a membrana neuronal e à liberação de FFNs na fenda sináptica extracelular.

No ambiente de pH neutro da fenda sináptica, a fluorescência FFN se intensifica.

Visualize a fatia novamente para observar a fluorescência difusa no espaço extracelular, confirmando a liberação de FFN das vesículas sinápticas.

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Last updated: 27 June 2026