Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 1:17 min. • March 4th, 2025
O sulfato de heparano, um glicosaminoglicano, está presente nas placas amilóides associadas à doença de Alzheimer.
Para visualizar o sulfato de heparano, comece com uma seção de tecido hipocampal humano doente contendo placas amilóides.
Fixe a seção de tecido usando um fixador para preservar as estruturas celulares.
Em seguida, trate o tecido com um agente bloqueador para evitar a ligação de anticorpos não específicos.
Adicione um detergente não iônico para permeabilizar as membranas celulares.
Incube o tecido com anticorpos primários que visam especificamente o sulfato de heparano dentro das placas amilóides.
Lave os anticorpos primários não ligados.
Em seguida, adicione anticorpos secundários conjugados com fluoróforo, que se ligam aos anticorpos primários ligados ao sulfato de heparano.
Remova quaisquer anticorpos não ligados.
Manchar os núcleos usando um corante fluorescente.
Finalmente, use um microscópio de fluorescência para visualizar o sulfato de heparano marcado com fluorescência dentro das placas amilóides e os núcleos de cor azul na seção de tecido doente.