JoVE Encyclopedia of Experiments
Neurociência
0 vistas • 1:21 min • May 30th, 2025
Pegue uma seção fixa de tecido cerebral cortical de camundongo exibindo axônios e dendritos neuronais. Os dendritos possuem saliências, conhecidas como espinhas dendríticas, que formam sinapses com axônios.
Incube o tecido com ferrocianeto de ósmio, que se liga aos lipídios, seguido por outra aplicação de ósmio, que aumenta o contraste estrutural para a imagem.
Mancha com um composto de metal pesado que se liga a macromoléculas e aumenta o contraste.
Desidratar usando concentrações crescentes de álcool para inclusão de resina.
Incorpore o tecido em resina, monte-o em um suporte e cubra-o com ouro para otimizar a qualidade da imagem.
Use microscopia eletrônica de varredura de feixe de íons focalizada para imagens tridimensionais.
Empregue um feixe de íons para remover uma fina camada de tecido embebido em resina, expondo uma superfície de imagem.
Focalize um feixe de elétrons na superfície exposta e detecte os elétrons retroespalhados para gerar uma imagem.
Realize cortes e imagens seriais e reconstrua uma imagem tridimensional, revelando uma rede neuronal cortical sinapticamente ligada.