Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 1:24 min. • August 7th, 2025
Pegue as construções musculares esqueléticas bioimpressas.
Essas construções contêm pilares de hidrogel de fibrina com fibras musculares e microesferas incorporadas.
A microesfera é uma estrutura polimérica porosa que envolve fatores neurotróficos.
Pegue os gânglios da raiz dorsal isolados de embriões de pintinho.
Coloque um gânglio em cada construção e incuba.
Os fatores neurotróficos são liberados das microesferas em uma concentração fisiológica controlada, facilitando o surgimento de projeções dos neurônios chamados neuritos.
Adicione um fixador para corrigir as construções.
Lave com um tampão e adicione uma solução de bloqueio para evitar a ligação inespecífica de anticorpos.
Incubar com os anticorpos primários, que se ligam especificamente ao neurite.
Enxágüe com tampão para remover anticorpos não ligados.
Adicione anticorpos secundários marcados com fluorescência que se ligam aos anticorpos primários.
Lave com tampão para remover o excesso de anticorpos.
Monte a construção usando um meio de montagem contendo um corante nuclear e uma lamínula.
Sob um microscópio confocal, visualize o crescimento do neurite.