Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 6:05 min. • August 29th, 2025
Prenda uma rata grávida anestesiada com seu útero exposto contendo embriões pré-neurulação. Nesse estágio, a placa neural está aberta e diretamente exposta ao líquido amniótico.
Posicione os embriões selecionados em uma placa de Petri com uma membrana elástica para estabilizá-los. Prenda os embriões e aplique solução salina para hidratação.
Alinhe a sonda de ultrassom sobre o embrião e meça o diâmetro da cavidade amniótica para calcular o volume ideal de injeção.
Posicione uma agulha de nanoinjeção contendo uma solução lentiviral de alto título acima do embrião alvo em um ângulo quase perpendicular.
Injete um pequeno volume preciso na cavidade amniótica, retraia suavemente a agulha e remova a sonda de ultrassom.
Empurre suavemente os embriões de volta para dentro do camundongo.
O lentivírus injetado se funde com as células da placa neural, liberando seu material genético, que sofre transcrição reversa em DNA e é integrado ao genoma do hospedeiro.
Isso permite a manipulação estável de genes nas células da placa neural, apoiando potenciais aplicações terapêuticas.
Usando uma pinça, segure o tecido entre os embriões e retire cuidadosamente os dois chifres uterinos do abdômen. Conte e numere o
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