Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 1:44 min. • August 29th, 2025
Comece com células de feocromocitoma 12 ou PC12 de rato em meios de crescimento básicos.
Pegue um poço revestido de colágeno contendo meios de diferenciação e coloque as células nele.
Incubar para facilitar a adesão celular.
Pegue um silício poroso nanoestruturado degradável ou filme PSi.
Os poros do filme são carregados com fator de crescimento nervoso ou NGF, que é adsorvido por meio de interações eletrostáticas entre o NGF carregado negativamente e a superfície PSi carregada positivamente.
Coloque o filme PSi carregado com NGF dentro do poço e incuba.
Troque a mídia em intervalos regulares.
O NGF dentro do filme PSi é liberado na mídia por difusão e quando o andaime de silício se degrada.
Este sistema de entrega permite uma liberação sustentada de NGF a uma taxa controlada por um período prolongado.
Os NGFs interagem com a célula PC12, permitindo sua sobrevivência e facilitando o crescimento e ramificação dos neuritos.
Semeie uma vez 10 elevado a quatro células por centímetro quadrado de área de trabalho em placas revestidas com colligen tipo um na presença de meio de diferenciação. Coloque as placas na incubadora.
Após 24 horas a 37 graus Celsius, adicione NGF beta murino fresco ou transportador de silício poroso carregado com NGF a cada placa e retorne as placas à incubadora.