Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 3:19 min. • August 29th, 2025
Comece com um camundongo anestesiado com o crânio exposto.
O crânio apresenta uma craniotomia sobre o osso interparietal, à esquerda da linha média e caudal à sutura lambdoide, com a dura-máter removida para expor o cerebelo.
Aspire o cerebelo lateral esquerdo para revelar o núcleo coclear dorsal subjacente ou DCN, uma estrutura do tronco cerebral que contém neurônios que processam sinais auditivos.
Adicione solução salina para evitar a coagulação do sangue e limpar o fluido residual.
Posicione uma microsseringa contendo um vetor viral que codifica opsina, um canal iônico sensível à luz.
Abaixe a agulha no DCN.
Injetar a suspensão viral a uma taxa controlada e, em seguida, retirar a agulha.
Suture a incisão e permita que o camundongo se recupere.
O vírus injetado se liga aos receptores neuronais DCN e sofre endocitose.
Dentro do núcleo neuronal, o DNA viral desencadeia a expressão gênica, levando à produção de opsina.
O modelo está pronto para estimulação induzida por luz da via auditiva.
Use um tubo de sucção de cinco French para aspirar a porção mais lateral do cerebelo esquerdo, sobrejacente ao DCN. Para auxiliar na aspiração, ajuste o plano focal do microscópio na profundidade esperada do
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