Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 2:40 min. • August 29th, 2025
Comece com o nervo ciático isolado de um camundongo.
Os neurônios dentro do nervo foram transfectados para expressar proteínas citoplasmáticas fluorescentes.
O nervo foi esmagado para induzir uma lesão, que foi marcada com uma sutura.
Os segmentos de axônio lesionados no local degeneram e os macrófagos recrutados limpam os detritos.
As células de Schwann proliferam para formar trilhas orientadoras e secretam fatores neurotróficos que promovem o crescimento do axônio. Os axônios se estendem ao longo dessas trilhas, regenerando o nervo.
Fixe o nervo para preservar as estruturas celulares e, em seguida, remova todos os tecidos não neuronais aderidos.
Lave com um tampão para eliminar fixadores residuais.
Posicione o nervo em uma lâmina de microscópio, aplique um meio de montagem e coloque uma lamínula.
Achate o nervo para posicionar os axônios dentro do mesmo plano focal para imagens.
Usando um microscópio de epifluorescência, rastreie os axônios do local do esmagamento até suas extremidades distais para
medir o comprimento da regeneração.
Separe os DRGs junto com as raízes nervosas e o nervo ciático, cuidadosamente com microtesoura e microfórceps sob o microscópio de dissecação.
Em seguida, trans
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