JoVE Encyclopedia of Experiments
Neurociência
0 vistas • 2:59 min • August 29th, 2025
Prenda um mouse pós-AVC anestesiado em uma estrutura estereotáxica.
Reabra a incisão no couro cabeludo e limpe o crânio exposto com algodão embebido em solução salina.
Identifique o núcleo necrótico branco-amarelo no tecido cerebral e um orifício de rebarba que confirme o local do AVC.
Este núcleo necrótico contém neurônios danificados e vasculatura não funcional.
Conecte uma seringa carregada com partículas de hidrogel microporoso à bomba e defina as coordenadas de injeção.
Abaixe a seringa acima do orifício da rebarba e insira-a no local do curso.
Injete o hidrogel a uma taxa de fluxo controlada para garantir a difusão gradual sem danos ao tecido cerebral.
Incube para permitir que o hidrogel se reticule, formando um andaime de biomaterial.
Retraia lentamente a seringa, garantindo a retenção de hidrogel sem vazamentos.
Feche a incisão com cola cirúrgica e retorne o mouse à sua gaiola.
O andaime de hidrogel mimetiza a matriz extracelular, induzindo infiltração celular e formação de novos vasos sanguíneos, indicando o potencial do hidrogel na neuroterapêutica.
Reabra a incisão sobre o cérebro e use algodão embebido em solução salina para limpar quaisquer detritos do crânio.
Um círculo de tecido branco e amarelo e o orifício da broca serão visíveis. Trave a bomba de injeção a 90 graus sobre o mouse.
Carregue a seringa na bomba e mova a bomba e as direções X e Y para orientar a seringa sobre o orifício da rebarba. Mova a bomba na direção Z até que a agulha toque o topo do orifício.
E redefina o Z no console do display digital. Mova a seringa 0.75 milímetros na direção Z e pressione start no console da bomba para injetar quatro a seis microlitros do hidrogel a uma taxa de fluxo de um microlitro por minuto. Quando todo o hidrogel tiver sido entregue, defina um cronômetro de cinco minutos para permitir que o gel comece a reticular.
Após cinco minutos, gire o botão Z para puxar lentamente a seringa. Quando a agulha estiver longe o suficiente do crânio, destrave e remova a bomba. Em seguida, feche a pele sobre o crânio e coloque o camundongo em uma gaiola limpa com monitoramento até que ele se recupere da anestesia.