Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 4:01 min. • August 29th, 2025
Comece com um camundongo anestesiado colocado em uma estrutura estereotáxica, com a cabeça inclinada para baixo para permitir um acesso mais fácil à cisterna magna, um espaço preenchido com líquido cefalorraquidiano ou LCR.
Uma incisão no couro cabeludo na linha média expõe a cisterna magna, que aparece como um triângulo invertido entre o cerebelo e a medula, coberto pela membrana dural.
Use um cotonete para limpar o excesso de fluido da dura-máter.
Usando uma pinça, segure uma cânula perto da parte da agulha.
Insira a agulha em um ângulo através da dura-máter no centro da cisterna magna, evitando a penetração no cerebelo e na medula.
Limpe qualquer LCR vazado.
Aplique adesivo na dura-máter para prender a cânula e, em seguida, adicione um acelerador de cola para adesão imediata.
Cubra a incisão com uma mistura de cimento e adesivo, seguida de um acelerador de cola.
O camundongo canulado intracisternal está pronto para a entrega direcionada de agentes terapêuticos no LCR.
Fixe o mouse no quadro estereotáxico, fazendo uso do arco intraneural ou do arco zigomático. Em seguida, incline a cabeça levemente para formar um ângulo de 120 graus em relação ao corpo.
Em seguida, aplique pomada oftálmica e reaplique conforme necessário durante a cirurgia. Encontre a crista occipital, que é a parte do crânio que se projeta imediatamente acima dos músculos do pescoço. Levante a pele sobrejacente usando uma pinça e corte um pedaço de pele em forma de amêndoa de aproximadamente um centímetro ao longo da linha média.
Em seguida, usando a crista occipital como ponto de referência, separe o tecido conjuntivo superficial para expor os músculos do pescoço abaixo. Use cotonetes ou lanças oculares para controlar qualquer sangramento resultante. Para prosseguir, separe os músculos na linha média passando cuidadosamente a pinça pelo meio do local da incisão no eixo anterior para posterior.
Em seguida, com um par de pinças curvas em cada mão, junte as pontas no meio perto da parte inferior do crânio e puxe os músculos para o lado para expor a cisterna magna. A cisterna magna parece um minúsculo triângulo invertido, delineado pelo cerebelo acima e medula abaixo. Usando uma lança ocular cirúrgica ou cotonete, limpe a membrana dural que cobre o CM.Em seguida, com uma pinça curva na mão dominante, segure a cânula perto da agulha coberta por tubo.
Em seguida, coloque o dedo médio da outra mão na barra auricular para criar um descanso estável para a cânula. Agora, no centro do CM, perfure a dura-máter a 45 graus em relação à cabeça do rato. Insira a agulha apenas onde o chanfro está sob a dura-máter para evitar penetrar no cerebelo ou medula.
Se necessário, limpe qualquer LCR vazado com uma lança ou cotonete. Em seguida, aplique algumas gotas de cianoacrilato na membrana dural que envolve a cânula e adicione uma gota de acelerador de cola para curar a cola imediatamente. Em seguida, combine cimento dental e cola de cianoacrilato.
Em seguida, cubra todo o local da incisão e aplique rapidamente uma gota de acelerador de cola para curar.